中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2007年
12期
1514-1516
,共3页
朱虹%罗顺峰%张万广%关剑%张必翔%陈孝平
硃虹%囉順峰%張萬廣%關劍%張必翔%陳孝平
주홍%라순봉%장만엄%관검%장필상%진효평
小分子干扰RNA%缺氧诱导因子-1α%抗药性,多药%癌,肝细胞
小分子榦擾RNA%缺氧誘導因子-1α%抗藥性,多藥%癌,肝細胞
소분자간우RNA%결양유도인자-1α%항약성,다약%암,간세포
目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)特异性小分子干扰RNA(siRNA)对肝癌化疗的增敏作用.方法 构建HIF-1αsiRNA真核表达质粒,经脂质体稳定转染于耐药的C28肝癌细胞.研究分为实验组、阴性对照组和空白对照组.荧光定量PCR和Western blot技术分别检测3组细胞中多药耐药相关基因MDR1、LRP、MRP1在mRNA和蛋白水平的表达,PI法流式细胞术分析3组细胞在受到5-Fu作用后的凋亡指数.每组细胞分别随机注入10只裸鼠皮下,比较3组细胞成瘤后对ADM治疗的反应性.结果 HIF-1αsiRNA能有效抑制HIF-1α基因的表达,并能使C28耐药肝癌细胞内MDR1、MRP1、LRP基因在mRNA和蛋白水平表达明显下降.在5-Fu作用后第24、48、72小时,实验组细胞的凋亡指数分别是阴性对照组的2.88、3.56和3.87倍,实验组对化疗药物5-Fu的敏感性显著增强(P＜0.01).注射阿霉素后,实验组裸鼠皮下的耐药肝癌瘤体明显缩小,肿瘤抑制率为41.35%,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 成功构建了HIF-1α-siRNA的真核表达质粒.HIF-1α靶序列特异性的siRNA可增强肝癌细胞对化疗药物的敏感性,它与传统化疗药物的联合应用可望实现对肝癌的有效治疗.
目的 觀察缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)特異性小分子榦擾RNA(siRNA)對肝癌化療的增敏作用.方法 構建HIF-1αsiRNA真覈錶達質粒,經脂質體穩定轉染于耐藥的C28肝癌細胞.研究分為實驗組、陰性對照組和空白對照組.熒光定量PCR和Western blot技術分彆檢測3組細胞中多藥耐藥相關基因MDR1、LRP、MRP1在mRNA和蛋白水平的錶達,PI法流式細胞術分析3組細胞在受到5-Fu作用後的凋亡指數.每組細胞分彆隨機註入10隻裸鼠皮下,比較3組細胞成瘤後對ADM治療的反應性.結果 HIF-1αsiRNA能有效抑製HIF-1α基因的錶達,併能使C28耐藥肝癌細胞內MDR1、MRP1、LRP基因在mRNA和蛋白水平錶達明顯下降.在5-Fu作用後第24、48、72小時,實驗組細胞的凋亡指數分彆是陰性對照組的2.88、3.56和3.87倍,實驗組對化療藥物5-Fu的敏感性顯著增彊(P＜0.01).註射阿黴素後,實驗組裸鼠皮下的耐藥肝癌瘤體明顯縮小,腫瘤抑製率為41.35%,與陰性對照組比較差異有統計學意義(P＜0.01).結論 成功構建瞭HIF-1α-siRNA的真覈錶達質粒.HIF-1α靶序列特異性的siRNA可增彊肝癌細胞對化療藥物的敏感性,它與傳統化療藥物的聯閤應用可望實現對肝癌的有效治療.
목적 관찰결양유도인자-1α(HIF-1α)특이성소분자간우RNA(siRNA)대간암화료적증민작용.방법 구건HIF-1αsiRNA진핵표체질립,경지질체은정전염우내약적C28간암세포.연구분위실험조、음성대조조화공백대조조.형광정량PCR화Western blot기술분별검측3조세포중다약내약상관기인MDR1、LRP、MRP1재mRNA화단백수평적표체,PI법류식세포술분석3조세포재수도5-Fu작용후적조망지수.매조세포분별수궤주입10지라서피하,비교3조세포성류후대ADM치료적반응성.결과 HIF-1αsiRNA능유효억제HIF-1α기인적표체,병능사C28내약간암세포내MDR1、MRP1、LRP기인재mRNA화단백수평표체명현하강.재5-Fu작용후제24、48、72소시,실험조세포적조망지수분별시음성대조조적2.88、3.56화3.87배,실험조대화료약물5-Fu적민감성현저증강(P＜0.01).주사아매소후,실험조라서피하적내약간암류체명현축소,종류억제솔위41.35%,여음성대조조비교차이유통계학의의(P＜0.01).결론 성공구건료HIF-1α-siRNA적진핵표체질립.HIF-1α파서렬특이성적siRNA가증강간암세포대화료약물적민감성,타여전통화료약물적연합응용가망실현대간암적유효치료.
