生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2004年
4期
28-30
,共3页
姚志海%叶志华%梁建庆%张向阳%柳海林%杜纲国%高冬梅
姚誌海%葉誌華%樑建慶%張嚮暘%柳海林%杜綱國%高鼕梅
요지해%협지화%량건경%장향양%류해림%두강국%고동매
RNA Blot膜%杂交%脱除%二甲基甲酰胺%地高辛标记%cDNA探针
RNA Blot膜%雜交%脫除%二甲基甲酰胺%地高辛標記%cDNA探針
RNA Blot막%잡교%탈제%이갑기갑선알%지고신표기%cDNA탐침
目的:探讨脱除RNA Blot膜上的杂交探针的方法,解决杂交中RNA Blot膜重复使用的问题.方法:经NBT/BCIP化学显色的RNA Blot杂交膜先用二甲基甲酰胺在60℃处理90min,然后用脱探针溶液(50%去离子甲酰胺、50mmol/L Tris-HCl pH7.5、5%SDS)在80℃处理90min,经过处理的膜再次用于下一轮的杂交.结果:用这一改进的方法,可以完全脱除杂交膜上的地高辛标记的cDNA探针,RNA Blot膜可以重复杂交5轮以上,杂交带仍然保持清晰锐利.结论:该改进方法操作简便,能有效地脱除杂交膜上的地高辛标记的cDNA探针.
目的:探討脫除RNA Blot膜上的雜交探針的方法,解決雜交中RNA Blot膜重複使用的問題.方法:經NBT/BCIP化學顯色的RNA Blot雜交膜先用二甲基甲酰胺在60℃處理90min,然後用脫探針溶液(50%去離子甲酰胺、50mmol/L Tris-HCl pH7.5、5%SDS)在80℃處理90min,經過處理的膜再次用于下一輪的雜交.結果:用這一改進的方法,可以完全脫除雜交膜上的地高辛標記的cDNA探針,RNA Blot膜可以重複雜交5輪以上,雜交帶仍然保持清晰銳利.結論:該改進方法操作簡便,能有效地脫除雜交膜上的地高辛標記的cDNA探針.
목적:탐토탈제RNA Blot막상적잡교탐침적방법,해결잡교중RNA Blot막중복사용적문제.방법:경NBT/BCIP화학현색적RNA Blot잡교막선용이갑기갑선알재60℃처리90min,연후용탈탐침용액(50%거리자갑선알、50mmol/L Tris-HCl pH7.5、5%SDS)재80℃처리90min,경과처리적막재차용우하일륜적잡교.결과:용저일개진적방법,가이완전탈제잡교막상적지고신표기적cDNA탐침,RNA Blot막가이중복잡교5륜이상,잡교대잉연보지청석예리.결론:해개진방법조작간편,능유효지탈제잡교막상적지고신표기적cDNA탐침.
