CAJ | 학술논문

目的构建人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)真核表达质粒,研究其在体内外的表达.方法通过基因克隆技术,构建并大量制备pcDNA3.1/myc-His(-)-bFGF真核表达体系,RT-PCR和细胞免疫组织化学方法检测体外瞬时表达情况;直流电脉冲介导重组质粒pcDNA3.1/myc-His(-)-bFGF和pCD2-血管内皮细胞生长因子121(vascular endothelial growth factor,VEGF121)在兔颈部肌肉瓣内转移并表达,测定其促血管生成的生物学效应.结果构建的pcDNA3.1/myc-His(-)-bFGF真核表达体系成功转染体外培养HeLa细胞,目的基因在mRNA水平和蛋白水平均有表达.pcDNA3.1/myc-His(-)-bFGF和pCD2-VEGF121重组质粒分别转染在体肌瓣,获得外源基因高水平表达.转基因肌肉发生血管增生、血流增强的生物学效应.结论构建了人bFGF真核表达质粒,并可在体内外顺利表达,为进一步组织移植或组织工程基因治疗研究奠定了基础.
목적구건인감성성섬유세포생장인자(basic fibroblast growth factor,bFGF)진핵표체질립,연구기재체내외적표체.방법통과기인극륭기술,구건병대량제비pcDNA3.1/myc-His(-)-bFGF진핵표체체계,RT-PCR화세포면역조직화학방법검측체외순시표체정황;직류전맥충개도중조질립pcDNA3.1/myc-His(-)-bFGF화pCD2-혈관내피세포생장인자121(vascular endothelial growth factor,VEGF121)재토경부기육판내전이병표체,측정기촉혈관생성적생물학효응.결과구건적pcDNA3.1/myc-His(-)-bFGF진핵표체체계성공전염체외배양HeLa세포,목적기인재mRNA수평화단백수평균유표체.pcDNA3.1/myc-His(-)-bFGF화pCD2-VEGF121중조질립분별전염재체기판,획득외원기인고수평표체.전기인기육발생혈관증생、혈류증강적생물학효응.결론구건료인bFGF진핵표체질립,병가재체내외순리표체,위진일보조직이식혹조직공정기인치료연구전정료기출.