中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2006年
5期
494-498
,共5页
杨和平%孟小林%徐进平%王健%鲁伟
楊和平%孟小林%徐進平%王健%魯偉
양화평%맹소림%서진평%왕건%로위
甜菜夜蛾核型多角体病毒%荧光定量PCR%TaqMan探针
甜菜夜蛾覈型多角體病毒%熒光定量PCR%TaqMan探針
첨채야아핵형다각체병독%형광정량PCR%TaqMan탐침
采用NCBI提供的BLAST软件在线检索SeMNPV特异性基因ORF22、ORF40,并将其构建到pMD18-T载体上.以纯化的pMD18-T-ORF22、pMD18-T-ORF40质粒为标准样品,已计数野生型SeMNPV的基因组作对照,用荧光定量PCR检测样品中SeMNPV多角体含量.荧光定量PCR检测得到标准曲线方程为con=10(-0.282CT+9.965) (相关系数:R2=0.9997)和con=10(-0.296CT+9.945) (相关系数:R2＝0.9995).测得一个SeMNPV多角体包含102核酸分子,检测到SeMNPV复合剂包含 633 PIBs/mg、691 PIBs/mg SeMNPV多角体,两者结果一致.与复合剂中SeMNPV实际含量相符.
採用NCBI提供的BLAST軟件在線檢索SeMNPV特異性基因ORF22、ORF40,併將其構建到pMD18-T載體上.以純化的pMD18-T-ORF22、pMD18-T-ORF40質粒為標準樣品,已計數野生型SeMNPV的基因組作對照,用熒光定量PCR檢測樣品中SeMNPV多角體含量.熒光定量PCR檢測得到標準麯線方程為con=10(-0.282CT+9.965) (相關繫數:R2=0.9997)和con=10(-0.296CT+9.945) (相關繫數:R2＝0.9995).測得一箇SeMNPV多角體包含102覈痠分子,檢測到SeMNPV複閤劑包含 633 PIBs/mg、691 PIBs/mg SeMNPV多角體,兩者結果一緻.與複閤劑中SeMNPV實際含量相符.
채용NCBI제공적BLAST연건재선검색SeMNPV특이성기인ORF22、ORF40,병장기구건도pMD18-T재체상.이순화적pMD18-T-ORF22、pMD18-T-ORF40질립위표준양품,이계수야생형SeMNPV적기인조작대조,용형광정량PCR검측양품중SeMNPV다각체함량.형광정량PCR검측득도표준곡선방정위con=10(-0.282CT+9.965) (상관계수:R2=0.9997)화con=10(-0.296CT+9.945) (상관계수:R2＝0.9995).측득일개SeMNPV다각체포함102핵산분자,검측도SeMNPV복합제포함 633 PIBs/mg、691 PIBs/mg SeMNPV다각체,량자결과일치.여복합제중SeMNPV실제함량상부.
