真核表达载体pCMV-(Kozak)TFPI在搭桥模型移植静脉中的表达
진핵표체재체pCMV-(Kozak)TFPI재탑교모형이식정맥중적표체
Expression of eukaryotic expressed plasmid vector pCMV-(Kozak)TFPI in vein grafts of bypass graft model
  • 万方数据
    中国老年学杂志 중국노년학잡지
    CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
    2008年 7期 628-630 ,共3页

    厉泉%张凯伦%蒋雄刚%孙图成%龚永生%祖育昆%郭超%徐鹏

    려천%장개륜%장웅강%손도성%공영생%조육곤%곽초%서붕

    冠状动脉旁路移植术%组织因子途径抑制因子%移植静脉%转染 冠狀動脈徬路移植術%組織因子途徑抑製因子%移植靜脈%轉染
    관상동맥방로이식술%조직인자도경억제인자%이식정맥%전염
    目的 构建真核表达载体Pcmv-(Kozak)TFPI并检测其在移植静脉中的表达,为冠状动脉旁路移植术中转染大隐静脉内皮细胞抗凝治疗的临床试验奠定理论应用基础.方法 用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法提取人组织因子途径抑制因子(TFPI)基因,并引入Kozak序列,将(Kozak)TFPI亚克隆入Pcmv质粒中.在阳离子脂质体介导下,转染颈总动脉搭桥模型移植静脉内皮细胞.RT-PCR、蛋白印迹法(Western印迹)和免疫组化法检测移植静脉中外源TFPI基因Mrna和蛋白的表达.结果 (Kozak)TFPI成功克隆入Pcmv中.RT-PCR、Western印迹和免疫组化检测到移植静脉中外源TFPI基因Mrna和蛋白的表达.结论 Pcmv-(Kozak)TFPI真核表达载体构建成功,移植静脉中检测到其蛋白的表达.
    목적 구건진핵표체재체Pcmv-(Kozak)TFPI병검측기재이식정맥중적표체,위관상동맥방로이식술중전염대은정맥내피세포항응치료적림상시험전정이론응용기출.방법 용역전록취합매련반응(RT-PCR)적방법제취인조직인자도경억제인자(TFPI)기인,병인입Kozak서렬,장(Kozak)TFPI아극륭입Pcmv질립중.재양리자지질체개도하,전염경총동맥탑교모형이식정맥내피세포.RT-PCR、단백인적법(Western인적)화면역조화법검측이식정맥중외원TFPI기인Mrna화단백적표체.결과 (Kozak)TFPI성공극륭입Pcmv중.RT-PCR、Western인적화면역조화검측도이식정맥중외원TFPI기인Mrna화단백적표체.결론 Pcmv-(Kozak)TFPI진핵표체재체구건성공,이식정맥중검측도기단백적표체.
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