石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2009年
4期
437-440
,共4页
唐利燕%陈创夫%王远志%张辉%张红星
唐利燕%陳創伕%王遠誌%張輝%張紅星
당리연%진창부%왕원지%장휘%장홍성
布鲁氏菌%BP26蛋白%间接ELISA%标准试管凝集实验
佈魯氏菌%BP26蛋白%間接ELISA%標準試管凝集實驗
포로씨균%BP26단백%간접ELISA%표준시관응집실험
为了表达并纯化布鲁氏菌BP26蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法.方法:从布鲁氏菌疫苗株M5-90克隆bp26基因,在大肠杆菌E.coli B121(DE3)中表达,纯化BP26蛋白,进行SDS-PAGE、Western-blot检测,将纯化的BP26蛋白包被ELISA板,建立检测布鲁氏菌病的间接ELISA方法,用该方法检测42份绵羊血清,结果与标准试管凝集试验(SAT)进行比较.结果显示:正确表达并纯化了BP26蛋白,布鲁氏菌标准试管凝集试验检测的阳性率为30.85%(13/42);间接ELISA方法检测的阳性率为35.71%(15/42),二者阳性符合率为86.67%(13/15).结论表达、纯化的BP26蛋白能够与布鲁氏菌阳性血清特异性结合,建立的ELISA方法比SAT方法更敏感.为以后M5-90疫苗株bp26基因缺失苗的应用提供配套性血清学检测奠定基础.
為瞭錶達併純化佈魯氏菌BP26蛋白作為包被抗原,建立間接ELISA檢測方法.方法:從佈魯氏菌疫苗株M5-90剋隆bp26基因,在大腸桿菌E.coli B121(DE3)中錶達,純化BP26蛋白,進行SDS-PAGE、Western-blot檢測,將純化的BP26蛋白包被ELISA闆,建立檢測佈魯氏菌病的間接ELISA方法,用該方法檢測42份綿羊血清,結果與標準試管凝集試驗(SAT)進行比較.結果顯示:正確錶達併純化瞭BP26蛋白,佈魯氏菌標準試管凝集試驗檢測的暘性率為30.85%(13/42);間接ELISA方法檢測的暘性率為35.71%(15/42),二者暘性符閤率為86.67%(13/15).結論錶達、純化的BP26蛋白能夠與佈魯氏菌暘性血清特異性結閤,建立的ELISA方法比SAT方法更敏感.為以後M5-90疫苗株bp26基因缺失苗的應用提供配套性血清學檢測奠定基礎.
위료표체병순화포로씨균BP26단백작위포피항원,건립간접ELISA검측방법.방법:종포로씨균역묘주M5-90극륭bp26기인,재대장간균E.coli B121(DE3)중표체,순화BP26단백,진행SDS-PAGE、Western-blot검측,장순화적BP26단백포피ELISA판,건립검측포로씨균병적간접ELISA방법,용해방법검측42빈면양혈청,결과여표준시관응집시험(SAT)진행비교.결과현시:정학표체병순화료BP26단백,포로씨균표준시관응집시험검측적양성솔위30.85%(13/42);간접ELISA방법검측적양성솔위35.71%(15/42),이자양성부합솔위86.67%(13/15).결론표체、순화적BP26단백능구여포로씨균양성혈청특이성결합,건립적ELISA방법비SAT방법경민감.위이후M5-90역묘주bp26기인결실묘적응용제공배투성혈청학검측전정기출.
