CAJ | 학술논문

目的:观察持续机械压迫(CCD)对瞬时感受器电位离子通道4(TRPV4)基因、蛋白表达及功能的影响,明确TRPV4是否参与CCD导致的机械和热痛敏.方法:建立CCD模型后,分别于手术前及手术后第7天、第14天及第28天取材前测量运动功能、机械刺激缩爪反应阈值和热辐射刺激缩爪反应潜伏期.为了测量TRPV4反义核苷酸干扰对机械和热痛阈值的影响,在蛛网膜下腔内注入TRPV4寡脱氧核苷酸(ODN)40μg/d,每天1次,第7天后测量大鼠行为学变化.使用实时定量RT-PCR检测TRPV4基因表达的变化,Western blot检测TRPV4蛋白质表达量的变化,激光共聚焦检测低渗溶液和佛波醇(4α-PDD)刺激背根神经节(DRG)神经元后细胞内钙离子浓度的变化.结果:所有动物在损伤前后步态均正常,持续压迫明显降低大鼠的机械和热痛阈,TRPV4干扰可部分逆转该痛敏.持续机械压迫可以明显增加TRPV4基因和蛋白的表达,手术后第7天,第14天和第28天,TRPV4 mRNA的表达分别为假手术组大鼠的4.29倍、2.95倍和2.48倍,蛋白表达量分别为假手术组大鼠的4.34倍,3.88倍和2.47倍.持续机械压迫后,对低渗溶液和4α-PDD产生反应的DRG神经元的比例数增加,细胞内钙的峰值增高.这种反应被TRPV4反义ODN所抑制.结论:CCD可以上调TRPV4的基因、蛋白表达,敏化通道的功能;TRPV4参与介导CCD导致的机械和热痛敏.
목적:관찰지속궤계압박(CCD)대순시감수기전위리자통도4(TRPV4)기인、단백표체급공능적영향,명학TRPV4시부삼여CCD도치적궤계화열통민.방법:건립CCD모형후,분별우수술전급수술후제7천、제14천급제28천취재전측량운동공능、궤계자격축조반응역치화열복사자격축조반응잠복기.위료측량TRPV4반의핵감산간우대궤계화열통역치적영향,재주망막하강내주입TRPV4과탈양핵감산(ODN)40μg/d,매천1차,제7천후측량대서행위학변화.사용실시정량RT-PCR검측TRPV4기인표체적변화,Western blot검측TRPV4단백질표체량적변화,격광공취초검측저삼용액화불파순(4α-PDD)자격배근신경절(DRG)신경원후세포내개리자농도적변화.결과:소유동물재손상전후보태균정상,지속압박명현강저대서적궤계화열통역,TRPV4간우가부분역전해통민.지속궤계압박가이명현증가TRPV4기인화단백적표체,수술후제7천,제14천화제28천,TRPV4 mRNA적표체분별위가수술조대서적4.29배、2.95배화2.48배,단백표체량분별위가수술조대서적4.34배,3.88배화2.47배.지속궤계압박후,대저삼용액화4α-PDD산생반응적DRG신경원적비례수증가,세포내개적봉치증고.저충반응피TRPV4반의ODN소억제.결론:CCD가이상조TRPV4적기인、단백표체,민화통도적공능;TRPV4삼여개도CCD도치적궤계화열통민.