安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
13期
7645-7649
,共5页
黄霖%余榕捷%李娟%刘晓飞%王静静
黃霖%餘榕捷%李娟%劉曉飛%王靜靜
황림%여용첩%리연%류효비%왕정정
PACAP-PTD%PACAP%内含肽%FITC%血脑屏障%原核表达
PACAP-PTD%PACAP%內含肽%FITC%血腦屏障%原覈錶達
PACAP-PTD%PACAP%내함태%FITC%혈뇌병장%원핵표체
[目的]制备重组蛋白PACAP-PTD,并对其活性进行鉴定.[方法]设计编码融合蛋白PACAP-PTD基因,克隆到表达载体pKYB,构建重组表达载体pKYB-PACAP-PTD,转化大肠杆菌ER2566中.采用IPTG诱导由PACAP-PTD、内含肽和几丁质组成的融合蛋白表达.利用IMPACT( Intein Mediated Purification with an Affinity Chitin-binding Tag)介导的纯化系统制备目的融合蛋白PACAP-PTD,并对其活性进行鉴定.[结果]试验所得的目的蛋白经测定分子量,结果与理论值相符,且试验中PACAP-PTD能有效的穿越血脑屏障.[结论]融合蛋白PACAP-PTD的构建和制备为其生物学功能的深入研究奠定了基础,同时可用于改善其用药途径,扩大其应用范围.
[目的]製備重組蛋白PACAP-PTD,併對其活性進行鑒定.[方法]設計編碼融閤蛋白PACAP-PTD基因,剋隆到錶達載體pKYB,構建重組錶達載體pKYB-PACAP-PTD,轉化大腸桿菌ER2566中.採用IPTG誘導由PACAP-PTD、內含肽和幾丁質組成的融閤蛋白錶達.利用IMPACT( Intein Mediated Purification with an Affinity Chitin-binding Tag)介導的純化繫統製備目的融閤蛋白PACAP-PTD,併對其活性進行鑒定.[結果]試驗所得的目的蛋白經測定分子量,結果與理論值相符,且試驗中PACAP-PTD能有效的穿越血腦屏障.[結論]融閤蛋白PACAP-PTD的構建和製備為其生物學功能的深入研究奠定瞭基礎,同時可用于改善其用藥途徑,擴大其應用範圍.
[목적]제비중조단백PACAP-PTD,병대기활성진행감정.[방법]설계편마융합단백PACAP-PTD기인,극륭도표체재체pKYB,구건중조표체재체pKYB-PACAP-PTD,전화대장간균ER2566중.채용IPTG유도유PACAP-PTD、내함태화궤정질조성적융합단백표체.이용IMPACT( Intein Mediated Purification with an Affinity Chitin-binding Tag)개도적순화계통제비목적융합단백PACAP-PTD,병대기활성진행감정.[결과]시험소득적목적단백경측정분자량,결과여이론치상부,차시험중PACAP-PTD능유효적천월혈뇌병장.[결론]융합단백PACAP-PTD적구건화제비위기생물학공능적심입연구전정료기출,동시가용우개선기용약도경,확대기응용범위.
