免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2004年
1期
70-73
,共4页
王彦芳%焦艳晴%董爱华%耿娅%贾茜
王彥芳%焦豔晴%董愛華%耿婭%賈茜
왕언방%초염청%동애화%경아%가천
肝再生增强因子%基因重组人ALR的二聚体%单克隆抗体%夹心ELISA%ALR的组织定位
肝再生增彊因子%基因重組人ALR的二聚體%單剋隆抗體%夾心ELISA%ALR的組織定位
간재생증강인자%기인중조인ALR적이취체%단극륭항체%협심ELISA%ALR적조직정위
目的制备抗重组人肝再生增强因子(ALR)的单克隆抗体(McAb).方法以基因重组人ALR二聚体(drhALR)为抗原,免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体.用常规法制备抗ALR单体(mrhALR)多抗,建立夹心ELISA法测定ALR,初步确定ALR在小鼠组织的分布;用荧光免疫方法对胎鼠各组织进行ALR检测.结果筛选出3株稳定分泌抗drhALR的单抗杂交瘤细胞株,免疫球蛋白亚类分别为IgG1、IgG2a、IgG2b,特异性高,用于rhALR的免疫印迹及ELISA检测,可同时识别rhALR单体(mrhALR)和二聚体(drhALR);夹心ELISA法检测小鼠肝、肾、脾提取液ALR含量与鼠龄无关,各脏器的ALR含量不同,分别为肝0.36 μg/g、肾0.11 μg/g、脾0.05 μg/g;免疫荧光检测胎鼠,各器官有不同程度ALR的存在,无器官特异性.结论用drhALR为抗原制备的抗rhALR单克隆抗体,能够用于ALR的体内外免疫学检测,为rhALR及生化提取ALR的药理学研究及质量标准奠定了基础.
目的製備抗重組人肝再生增彊因子(ALR)的單剋隆抗體(McAb).方法以基因重組人ALR二聚體(drhALR)為抗原,免疫Balb/c小鼠,製備單剋隆抗體.用常規法製備抗ALR單體(mrhALR)多抗,建立夾心ELISA法測定ALR,初步確定ALR在小鼠組織的分佈;用熒光免疫方法對胎鼠各組織進行ALR檢測.結果篩選齣3株穩定分泌抗drhALR的單抗雜交瘤細胞株,免疫毬蛋白亞類分彆為IgG1、IgG2a、IgG2b,特異性高,用于rhALR的免疫印跡及ELISA檢測,可同時識彆rhALR單體(mrhALR)和二聚體(drhALR);夾心ELISA法檢測小鼠肝、腎、脾提取液ALR含量與鼠齡無關,各髒器的ALR含量不同,分彆為肝0.36 μg/g、腎0.11 μg/g、脾0.05 μg/g;免疫熒光檢測胎鼠,各器官有不同程度ALR的存在,無器官特異性.結論用drhALR為抗原製備的抗rhALR單剋隆抗體,能夠用于ALR的體內外免疫學檢測,為rhALR及生化提取ALR的藥理學研究及質量標準奠定瞭基礎.
목적제비항중조인간재생증강인자(ALR)적단극륭항체(McAb).방법이기인중조인ALR이취체(drhALR)위항원,면역Balb/c소서,제비단극륭항체.용상규법제비항ALR단체(mrhALR)다항,건립협심ELISA법측정ALR,초보학정ALR재소서조직적분포;용형광면역방법대태서각조직진행ALR검측.결과사선출3주은정분비항drhALR적단항잡교류세포주,면역구단백아류분별위IgG1、IgG2a、IgG2b,특이성고,용우rhALR적면역인적급ELISA검측,가동시식별rhALR단체(mrhALR)화이취체(drhALR);협심ELISA법검측소서간、신、비제취액ALR함량여서령무관,각장기적ALR함량불동,분별위간0.36 μg/g、신0.11 μg/g、비0.05 μg/g;면역형광검측태서,각기관유불동정도ALR적존재,무기관특이성.결론용drhALR위항원제비적항rhALR단극륭항체,능구용우ALR적체내외면역학검측,위rhALR급생화제취ALR적약이학연구급질량표준전정료기출.
