中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2004年
4期
208-211
,共4页
孙明%赵铁柱%王传彬%李纯玲%丁银巧%王宏伟%陈西钊%田克恭
孫明%趙鐵柱%王傳彬%李純玲%丁銀巧%王宏偉%陳西釗%田剋恭
손명%조철주%왕전빈%리순령%정은교%왕굉위%진서쇠%전극공
禽流感病毒%非结构蛋白%表达
禽流感病毒%非結構蛋白%錶達
금류감병독%비결구단백%표체
目的表达H5N1亚型禽流感病毒(AIV)NS1蛋白,用于AIV感染与注射灭活疫苗鸡的鉴别诊断和NS1蛋白功能研究.方法采用RT-PCR方法对H5N1亚型AIV NS1基因进行扩增,将PCR产物克隆于pGEM-T-easy载体,将该基因插入pGEX-4T-1中构建NS1基因原核表达载体,转化BL21大肠杆菌后,在IPTG诱导下表达NS1蛋白,Western blot鉴定表达NS1蛋白.结果成功克隆H5N1亚型AIV的NS1基因,其核苷酸序列长度为690 bp,编码230个氨基酸残基.构建NS1基因原核表达载体在大肠杆菌内表达出约51×103的NS1融合蛋白.Western blot鉴定表明:表达NS1蛋白与H7N2 AIV感染鸡血清有反应性.结论在大肠杆菌中成功表达了H5N1亚型AIV NS1基因蛋白,具有与感染H7N2亚型AIV阳性血清反应原性.
目的錶達H5N1亞型禽流感病毒(AIV)NS1蛋白,用于AIV感染與註射滅活疫苗鷄的鑒彆診斷和NS1蛋白功能研究.方法採用RT-PCR方法對H5N1亞型AIV NS1基因進行擴增,將PCR產物剋隆于pGEM-T-easy載體,將該基因插入pGEX-4T-1中構建NS1基因原覈錶達載體,轉化BL21大腸桿菌後,在IPTG誘導下錶達NS1蛋白,Western blot鑒定錶達NS1蛋白.結果成功剋隆H5N1亞型AIV的NS1基因,其覈苷痠序列長度為690 bp,編碼230箇氨基痠殘基.構建NS1基因原覈錶達載體在大腸桿菌內錶達齣約51×103的NS1融閤蛋白.Western blot鑒定錶明:錶達NS1蛋白與H7N2 AIV感染鷄血清有反應性.結論在大腸桿菌中成功錶達瞭H5N1亞型AIV NS1基因蛋白,具有與感染H7N2亞型AIV暘性血清反應原性.
목적표체H5N1아형금류감병독(AIV)NS1단백,용우AIV감염여주사멸활역묘계적감별진단화NS1단백공능연구.방법채용RT-PCR방법대H5N1아형AIV NS1기인진행확증,장PCR산물극륭우pGEM-T-easy재체,장해기인삽입pGEX-4T-1중구건NS1기인원핵표체재체,전화BL21대장간균후,재IPTG유도하표체NS1단백,Western blot감정표체NS1단백.결과성공극륭H5N1아형AIV적NS1기인,기핵감산서렬장도위690 bp,편마230개안기산잔기.구건NS1기인원핵표체재체재대장간균내표체출약51×103적NS1융합단백.Western blot감정표명:표체NS1단백여H7N2 AIV감염계혈청유반응성.결론재대장간균중성공표체료H5N1아형AIV NS1기인단백,구유여감염H7N2아형AIV양성혈청반응원성.
