CAJ | 학술논문

为了建立β干扰素与人血清白蛋白融合蛋白(IFNβ-HSA)的酶联免疫定量分析方法,以抗IFNβ单克隆抗体为包被抗体,IFNβ-HSA融合蛋白为夹心抗原,辣根过氧化酶(HRP)标记抗HSA单克隆抗体为检测抗体,建立了一种定量测定IFNβ-HSA融合蛋白的双抗体夹心ELISA方法.并进行了检测限、精密度、准确度和稳定性等方法学考核.结果表明,包被抗体和检测抗体的最佳工作浓度均为2μg/ml,抗原浓度在51.88-3320 ng/ml范围内呈良好线性关系,相关系数R2>0.99.检测限为10ng/m1.经方法学考核,批内、批间变异系数分别为4.86%和8.08%,回收率为91.9%～110.4%,与IFN-B、IFN-α、HSA、IFNα2b-HSA基本无交叉反应.健全性分析表明发酵液稀释倍数对该方法无影响,8 d连续检测标准曲线表明稳定性良好.这种定量检测IFNβ-HSA融合蛋白的双抗体夹心ELISA方法,灵敏度高,重复性好,为当前融合蛋白发酵优化、分离纯化研究提供了定量检测的方法,并为后期药代动力学、临床研究提供了思路和备选方法.
위료건립β간우소여인혈청백단백융합단백(IFNβ-HSA)적매련면역정량분석방법,이항IFNβ단극륭항체위포피항체,IFNβ-HSA융합단백위협심항원,랄근과양화매(HRP)표기항HSA단극륭항체위검측항체,건립료일충정량측정IFNβ-HSA융합단백적쌍항체협심ELISA방법.병진행료검측한、정밀도、준학도화은정성등방법학고핵.결과표명,포피항체화검측항체적최가공작농도균위2μg/ml,항원농도재51.88-3320 ng/ml범위내정량호선성관계,상관계수R2>0.99.검측한위10ng/m1.경방법학고핵,비내、비간변이계수분별위4.86%화8.08%,회수솔위91.9%～110.4%,여IFN-B、IFN-α、HSA、IFNα2b-HSA기본무교차반응.건전성분석표명발효액희석배수대해방법무영향,8 d련속검측표준곡선표명은정성량호.저충정량검측IFNβ-HSA융합단백적쌍항체협심ELISA방법,령민도고,중복성호,위당전융합단백발효우화、분리순화연구제공료정량검측적방법,병위후기약대동역학、림상연구제공료사로화비선방법.