CAJ | 학술논문

目的利用慢病毒介导的转基因方法制备红色荧光蛋白(mRFP)转基因小鼠,并建立转基因小鼠的技术平台.方法将携带mRFP基因的慢病毒注入ICR鼠单细胞受精卵卵周隙以感染受精卵,胚胎移植进假孕母鼠以获得仔代鼠,然后应用小动物活体成像仪、体视荧光显微镜和PCR等鉴定并获得mRFP转基因鼠.结果移植卵周隙注射有慢病毒的胚胎40枚给2只假孕母鼠,共获得仔鼠6只;利用体视荧光显微镜检测mRFP表达,在蛋白水平证实6只F0代中,2只 (R3和 R4) 鼠耳高表达mRFP,其余的弱表达mRFP(R1、R2和R5)或荧光强度(R6)与野生型ICR鼠无明显差别,而DNA水平检测证实,6只F0代中,5只(R1、R2、R3、R4和 R5)基因组中整合有外源转基因hUb-mRFP,预示基因型鉴定结果很好验证了体视荧光显微镜鉴定结果.此外,mRFP转基因首建鼠基因组中整合的mRFP基因可稳定遗传和表达.结论建立了慢病毒法快速制备转基因小鼠的技术平台,这为针对不同基因建立相应转基因小鼠以实现恒定或条件性的转基因过表达或RNA干涉 (RNAi),并进而在体内解析相应基因功能和建立人类疾病模型等奠定了坚实基础.
목적 이용만병독개도적전기인방법제비홍색형광단백(mRFP)전기인소서,병건립전기인소서적기술평태.방법 장휴대mRFP기인적만병독주입ICR서단세포수정란란주극이감염수정란,배태이식진가잉모서이획득자대서,연후응용소동물활체성상의、체시형광현미경화PCR등감정병획득mRFP전기인서.결과 이식란주극주사유만병독적배태40매급2지가잉모서,공획득자서6지;이용체시형광현미경검측mRFP표체,재단백수평증실6지F0대중,2지 (R3화 R4) 서이고표체mRFP,기여적약표체mRFP(R1、R2화R5)혹형광강도(R6)여야생형ICR서무명현차별,이DNA수평검측증실,6지F0대중,5지(R1、R2、R3、R4화 R5)기인조중정합유외원전기인hUb-mRFP,예시기인형감정결과흔호험증료체시형광현미경감정결과.차외,mRFP전기인수건서기인조중정합적mRFP기인가은정유전화표체.결론 건립료만병독법쾌속제비전기인소서적기술평태,저위침대불동기인건립상응전기인소서이실현항정혹조건성적전기인과표체혹RNA간섭 (RNAi),병진이재체내해석상응기인공능화건립인류질병모형등전정료견실기출.