中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2010年
11期
1028-1031,1047
,共5页
李旭旭%崔晶%井丰军%王书伟%王中全
李旭旭%崔晶%井豐軍%王書偉%王中全
리욱욱%최정%정봉군%왕서위%왕중전
旋毛虫%IgY%排泄分泌抗原%血清学诊断%循环抗原
鏇毛蟲%IgY%排洩分泌抗原%血清學診斷%循環抗原
선모충%IgY%배설분비항원%혈청학진단%순배항원
目的 制备抗旋毛虫肌幼虫排泄-分泌(excretory- secretory, ES)抗原的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),测定其效价及用于检测抗原的敏感性.方法 4只24 w龄罗曼母鸡用旋毛虫肌幼虫ES抗原经大腿外侧与胸部肌肉免疫4次(首次剂量为500μg/只,加强剂量为250μg/只),每次间隔 10d.取免疫前和首次免疫后42d的鸡蛋卵黄,用水稀释法提取IgY,考马斯亮蓝法测定蛋白含量,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹(Western blot)及间接荧光抗体试验(IFAT)对IgY进行分析,ELISA检测纯化后IgY的效价及检测抗原的敏感性.结果 罗曼鸡经ES抗原免疫后,每枚鸡蛋经提纯后均可得到约70mg抗体,SDS-PAGE表明纯化的IgY有2条主要蛋白带,分子量为67kDa、23 kDa,Western blot与IFAT发现提纯的IgY可识别肌幼虫虫体与ES抗原.IgY的抗体效价为1∶107,IgY-夹心ELISA检测旋毛虫抗原的敏感性为1.17ng/mL.结论 制备的抗旋毛虫ES抗原的IgY具有较高的效价与敏感性.
目的 製備抗鏇毛蟲肌幼蟲排洩-分泌(excretory- secretory, ES)抗原的鷄卵黃免疫毬蛋白(IgY),測定其效價及用于檢測抗原的敏感性.方法 4隻24 w齡囉曼母鷄用鏇毛蟲肌幼蟲ES抗原經大腿外側與胸部肌肉免疫4次(首次劑量為500μg/隻,加彊劑量為250μg/隻),每次間隔 10d.取免疫前和首次免疫後42d的鷄蛋卵黃,用水稀釋法提取IgY,攷馬斯亮藍法測定蛋白含量,十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)、蛋白質印跡(Western blot)及間接熒光抗體試驗(IFAT)對IgY進行分析,ELISA檢測純化後IgY的效價及檢測抗原的敏感性.結果 囉曼鷄經ES抗原免疫後,每枚鷄蛋經提純後均可得到約70mg抗體,SDS-PAGE錶明純化的IgY有2條主要蛋白帶,分子量為67kDa、23 kDa,Western blot與IFAT髮現提純的IgY可識彆肌幼蟲蟲體與ES抗原.IgY的抗體效價為1∶107,IgY-夾心ELISA檢測鏇毛蟲抗原的敏感性為1.17ng/mL.結論 製備的抗鏇毛蟲ES抗原的IgY具有較高的效價與敏感性.
목적 제비항선모충기유충배설-분비(excretory- secretory, ES)항원적계란황면역구단백(IgY),측정기효개급용우검측항원적민감성.방법 4지24 w령라만모계용선모충기유충ES항원경대퇴외측여흉부기육면역4차(수차제량위500μg/지,가강제량위250μg/지),매차간격 10d.취면역전화수차면역후42d적계단란황,용수희석법제취IgY,고마사량람법측정단백함량,십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)、단백질인적(Western blot)급간접형광항체시험(IFAT)대IgY진행분석,ELISA검측순화후IgY적효개급검측항원적민감성.결과 라만계경ES항원면역후,매매계단경제순후균가득도약70mg항체,SDS-PAGE표명순화적IgY유2조주요단백대,분자량위67kDa、23 kDa,Western blot여IFAT발현제순적IgY가식별기유충충체여ES항원.IgY적항체효개위1∶107,IgY-협심ELISA검측선모충항원적민감성위1.17ng/mL.결론 제비적항선모충ES항원적IgY구유교고적효개여민감성.
