大鼠CTLA4-FasL融合基因的克隆、表达及体外生物活性研究
대서CTLA4-FasL융합기인적극륭、표체급체외생물활성연구
Cloning and expression of rat CTLA4-FasL fusion gene and its biological activity in vitro
  • 万方数据
    军事医学 군사의학
    BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
    2011年 1期 58-62,77 ,共6页

    张瑾%王博%王越%汪习%阎瑾琦%徐元基%于继云%张巍

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    CTLA4%FasL%克隆%表达%生物活性 CTLA4%FasL%剋隆%錶達%生物活性
    CTLA4%FasL%극륭%표체%생물활성
    目的 表达并纯化CTLA4-FasL重组融合蛋白,鉴定其体外生物活性,为今后将该重组基因用于真核或者病毒载体递送系统的体内研究做准备.方法 用RT-PCR方法从大鼠脾细胞中钓取CTLA4和FasL胞外区基因,搭建二者融合的重组基因,以pGEX-6P-1载体表达和纯化融合蛋白;去除GST标签,获得的目的 蛋白经体外流式检测分析与细胞表面的相应配体B7和受体Fas分子的结合;CCK8检测系统分析其抑制T淋巴细胞的增殖作用.结果 与结论成功调取了目的 基因,获得并纯化了CTLA4-FasL目的 蛋白,该蛋白既可与细胞表面的B7配体结合,又可与细胞表面的Fas受体结合,并能明显抑制T淋巴细胞的增殖,为今后动物体内研究奠定了基础.
    목적 표체병순화CTLA4-FasL중조융합단백,감정기체외생물활성,위금후장해중조기인용우진핵혹자병독재체체송계통적체내연구주준비.방법 용RT-PCR방법종대서비세포중조취CTLA4화FasL포외구기인,탑건이자융합적중조기인,이pGEX-6P-1재체표체화순화융합단백;거제GST표첨,획득적목적 단백경체외류식검측분석여세포표면적상응배체B7화수체Fas분자적결합;CCK8검측계통분석기억제T림파세포적증식작용.결과 여결론성공조취료목적 기인,획득병순화료CTLA4-FasL목적 단백,해단백기가여세포표면적B7배체결합,우가여세포표면적Fas수체결합,병능명현억제T림파세포적증식,위금후동물체내연구전정료기출.
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