CAJ | 학술논문

为了找到最适合青虾眼柄总RNA抽提的方法,本试验先后使用RNAiso Plus、RNeasy Mini Kit、Unizol等产品抽提青虾眼柄总RNA并在方法上进行了改良,通过电泳、紫外分光光度计和RT-PCR对总RNA进行检测和分析.结果表明RNAiso法抽提的RNA色素含量高;改良RNAiso法抽提的RNA有部分降解,含色素少,对反转录酶有一定的抑制作用但不影响RT-PCR;RNeasy Mini Kit能有效去除抑制反转录酶活性的色素且RNA无降解,但DNA污染严重;RNAiso结合RNeasy Mini Kit法和Unizol结合RNeasy Mini Kit法提取的RNA均无DNA污染,也没有抑制反转录酶活性的色素,但后者所提的RNA完整性好.因此,Unizol结合RNeasy Mini Kit法最适合青虾眼柄总RNA的提取,可获得高质量的RNA用于RT-PCR、cDNA文库构建、定量PCR等实验.
위료조도최괄합청하안병총RNA추제적방법,본시험선후사용RNAiso Plus、RNeasy Mini Kit、Unizol등산품추제청하안병총RNA병재방법상진행료개량,통과전영、자외분광광도계화RT-PCR대총RNA진행검측화분석.결과표명RNAiso법추제적RNA색소함량고;개량RNAiso법추제적RNA유부분강해,함색소소,대반전록매유일정적억제작용단불영향RT-PCR;RNeasy Mini Kit능유효거제억제반전록매활성적색소차RNA무강해,단DNA오염엄중;RNAiso결합RNeasy Mini Kit법화Unizol결합RNeasy Mini Kit법제취적RNA균무DNA오염,야몰유억제반전록매활성적색소,단후자소제적RNA완정성호.인차,Unizol결합RNeasy Mini Kit법최괄합청하안병총RNA적제취,가획득고질량적RNA용우RT-PCR、cDNA문고구건、정량PCR등실험.