重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2012年
3期
201-204
,共4页
白光文%李红丽%申利红%芦永良%冯涛
白光文%李紅麗%申利紅%蘆永良%馮濤
백광문%리홍려%신리홍%호영량%풍도
肝前体细胞%全反式维甲酸%诱导分化%PAS染色法
肝前體細胞%全反式維甲痠%誘導分化%PAS染色法
간전체세포%전반식유갑산%유도분화%PAS염색법
目的:探讨全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)对肝前体细胞分化的影响.方法:取孕14.5 d胎鼠制备肝前体细胞,瞬时转染带白蛋白启动子(Albumin promoter)的荧光素酶报告质粒pALB-Luc,以便实时检测细胞的分化状态.优化ATRA诱导条件,分别于诱导后3、6、9d收集细胞总RNA,半定量RT-PCR检测分化相关指标的变化.并于诱导后11d用苏木精-伊红染色法观察细胞形态的改变,PAS染色观察细胞的分化成熟程度.结果:ATRA浓度为1μmol/L时对肝前体细胞分化诱导作用最强.与对照组相比,随培养时间的延长,ATRA组分化早期指标膜蛋白(Delta like,DLK)、细胞角蛋白(Cytokeratin 19,CK19)表达降低更为明显,而甲胎蛋白(Alpha fetal protein,AFP)、白蛋白(Albumin,ALB)表达更为升高.形态学观察细胞体积增大,呈多边形,核浆比率降低,相嵌紧密排列,可见双核细胞.PAS染色阳性率上升.结论:浓度1μmol/L的ATRA对肝前体细胞分化诱导作用最强,ATRA能诱导肝前体细胞分化为类肝细胞.
目的:探討全反式維甲痠(All-trans retinoic acid,ATRA)對肝前體細胞分化的影響.方法:取孕14.5 d胎鼠製備肝前體細胞,瞬時轉染帶白蛋白啟動子(Albumin promoter)的熒光素酶報告質粒pALB-Luc,以便實時檢測細胞的分化狀態.優化ATRA誘導條件,分彆于誘導後3、6、9d收集細胞總RNA,半定量RT-PCR檢測分化相關指標的變化.併于誘導後11d用囌木精-伊紅染色法觀察細胞形態的改變,PAS染色觀察細胞的分化成熟程度.結果:ATRA濃度為1μmol/L時對肝前體細胞分化誘導作用最彊.與對照組相比,隨培養時間的延長,ATRA組分化早期指標膜蛋白(Delta like,DLK)、細胞角蛋白(Cytokeratin 19,CK19)錶達降低更為明顯,而甲胎蛋白(Alpha fetal protein,AFP)、白蛋白(Albumin,ALB)錶達更為升高.形態學觀察細胞體積增大,呈多邊形,覈漿比率降低,相嵌緊密排列,可見雙覈細胞.PAS染色暘性率上升.結論:濃度1μmol/L的ATRA對肝前體細胞分化誘導作用最彊,ATRA能誘導肝前體細胞分化為類肝細胞.
목적:탐토전반식유갑산(All-trans retinoic acid,ATRA)대간전체세포분화적영향.방법:취잉14.5 d태서제비간전체세포,순시전염대백단백계동자(Albumin promoter)적형광소매보고질립pALB-Luc,이편실시검측세포적분화상태.우화ATRA유도조건,분별우유도후3、6、9d수집세포총RNA,반정량RT-PCR검측분화상관지표적변화.병우유도후11d용소목정-이홍염색법관찰세포형태적개변,PAS염색관찰세포적분화성숙정도.결과:ATRA농도위1μmol/L시대간전체세포분화유도작용최강.여대조조상비,수배양시간적연장,ATRA조분화조기지표막단백(Delta like,DLK)、세포각단백(Cytokeratin 19,CK19)표체강저경위명현,이갑태단백(Alpha fetal protein,AFP)、백단백(Albumin,ALB)표체경위승고.형태학관찰세포체적증대,정다변형,핵장비솔강저,상감긴밀배렬,가견쌍핵세포.PAS염색양성솔상승.결론:농도1μmol/L적ATRA대간전체세포분화유도작용최강,ATRA능유도간전체세포분화위류간세포.