大连医科大学学报
大連醫科大學學報
대련의과대학학보
JOURNAL OF DALIAN MEDICAL UNIVERSITY
2004年
2期
81-84,87
,共5页
EBERs%MDCK%分散活性%基质非依赖性%癌化
EBERs%MDCK%分散活性%基質非依賴性%癌化
EBERs%MDCK%분산활성%기질비의뢰성%암화
[目的] 通过转导EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)转录的核内小RNA(EBV encoded small RNAs,EBERs)探讨其对上皮细胞株MDCK细胞生长特性的影响.[方法] 用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术从EB病毒阳性的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)由来的NPC-KT细胞中扩增出EBERs片段.为了在细胞内大量表达EBERs,利用分子生物学技术,制作了EBERs片段的5次重复排列的5EBERs和10次重复排列的10EBERs.分别插入pCEP4载体质粒,并导入MDCK细胞内.利用Northern Blot法确定细胞内EBERs的表达后,对其在培养中的细胞生长特性和软琼脂中的细胞克隆形成进行了观察.[结果] 在培养中大量表达EBERs的MDCK细胞之间丧失了细胞间的相互连接,细胞呈纺锤状,并在软琼脂中形成大量细胞克隆.而非表达EBERs的MDCK细胞的对照组中没有发现细胞生长特性的改变和大量细胞克隆形成.[结论] EBERs的大量表达可以造成MDCK细胞的分散活性和基质非依赖性.提示EBERs在上皮细胞株MDCK细胞中有癌化作用,从而推论EBERs在同样源于上皮细胞的鼻咽癌中也可能有癌化作用.另外,表达EBERs的MDCK细胞的建立为进一步研究EBERs的作用提供了一个有用的上皮细胞模型.
[目的] 通過轉導EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)轉錄的覈內小RNA(EBV encoded small RNAs,EBERs)探討其對上皮細胞株MDCK細胞生長特性的影響.[方法] 用聚閤酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)技術從EB病毒暘性的鼻嚥癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)由來的NPC-KT細胞中擴增齣EBERs片段.為瞭在細胞內大量錶達EBERs,利用分子生物學技術,製作瞭EBERs片段的5次重複排列的5EBERs和10次重複排列的10EBERs.分彆插入pCEP4載體質粒,併導入MDCK細胞內.利用Northern Blot法確定細胞內EBERs的錶達後,對其在培養中的細胞生長特性和軟瓊脂中的細胞剋隆形成進行瞭觀察.[結果] 在培養中大量錶達EBERs的MDCK細胞之間喪失瞭細胞間的相互連接,細胞呈紡錘狀,併在軟瓊脂中形成大量細胞剋隆.而非錶達EBERs的MDCK細胞的對照組中沒有髮現細胞生長特性的改變和大量細胞剋隆形成.[結論] EBERs的大量錶達可以造成MDCK細胞的分散活性和基質非依賴性.提示EBERs在上皮細胞株MDCK細胞中有癌化作用,從而推論EBERs在同樣源于上皮細胞的鼻嚥癌中也可能有癌化作用.另外,錶達EBERs的MDCK細胞的建立為進一步研究EBERs的作用提供瞭一箇有用的上皮細胞模型.
[목적] 통과전도EB병독(Epstein-Barr Virus,EBV)전록적핵내소RNA(EBV encoded small RNAs,EBERs)탐토기대상피세포주MDCK세포생장특성적영향.[방법] 용취합매련반응(polymerase chain reaction,PCR)기술종EB병독양성적비인암(nasopharyngeal carcinoma,NPC)유래적NPC-KT세포중확증출EBERs편단.위료재세포내대량표체EBERs,이용분자생물학기술,제작료EBERs편단적5차중복배렬적5EBERs화10차중복배렬적10EBERs.분별삽입pCEP4재체질립,병도입MDCK세포내.이용Northern Blot법학정세포내EBERs적표체후,대기재배양중적세포생장특성화연경지중적세포극륭형성진행료관찰.[결과] 재배양중대량표체EBERs적MDCK세포지간상실료세포간적상호련접,세포정방추상,병재연경지중형성대량세포극륭.이비표체EBERs적MDCK세포적대조조중몰유발현세포생장특성적개변화대량세포극륭형성.[결론] EBERs적대량표체가이조성MDCK세포적분산활성화기질비의뢰성.제시EBERs재상피세포주MDCK세포중유암화작용,종이추론EBERs재동양원우상피세포적비인암중야가능유암화작용.령외,표체EBERs적MDCK세포적건립위진일보연구EBERs적작용제공료일개유용적상피세포모형.
