分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2007年
1期
141-144
,共4页
马尾松%磁珠富集%微卫星
馬尾鬆%磁珠富集%微衛星
마미송%자주부집%미위성
将马尾松核基因组DNA用Sau3A Ⅰ酶切后,电泳回收300~1 000 bp片段.在回收的片段上连接接头PCR后与用生物素标记的微卫星探针(AC)15、(AG)15杂交运用磁珠富集含有微卫星序列的DNA片段.将获得的序列通过PCR扩增后,连接pGEM-T载体,转化入感受态大肠杆菌,得到微卫星序列文库.然后用PCR法直接对文库进行扩增,获得58个阳性克隆,经测序分析,获微卫星序列33个,并成功设计出马尾松微卫星引物19对.
將馬尾鬆覈基因組DNA用Sau3A Ⅰ酶切後,電泳迴收300~1 000 bp片段.在迴收的片段上連接接頭PCR後與用生物素標記的微衛星探針(AC)15、(AG)15雜交運用磁珠富集含有微衛星序列的DNA片段.將穫得的序列通過PCR擴增後,連接pGEM-T載體,轉化入感受態大腸桿菌,得到微衛星序列文庫.然後用PCR法直接對文庫進行擴增,穫得58箇暘性剋隆,經測序分析,穫微衛星序列33箇,併成功設計齣馬尾鬆微衛星引物19對.
장마미송핵기인조DNA용Sau3A Ⅰ매절후,전영회수300~1 000 bp편단.재회수적편단상련접접두PCR후여용생물소표기적미위성탐침(AC)15、(AG)15잡교운용자주부집함유미위성서렬적DNA편단.장획득적서렬통과PCR확증후,련접pGEM-T재체,전화입감수태대장간균,득도미위성서렬문고.연후용PCR법직접대문고진행확증,획득58개양성극륭,경측서분석,획미위성서렬33개,병성공설계출마미송미위성인물19대.