CAJ | 학술논문

目的:探讨siRNA沉默survivin基因表达对胃癌细胞生长的抑制作用及其机制,为胃癌及survivin阳性肿瘤的治疗提供理论依据.方法:针对survivin mRNA序列设计合成编码siRNA的DNA模板,构建2个重组质粒pGCsileneerU6/GFP/survivin siRNA-1和-2;实验分为脂质体对照、空质粒转染对照及survivin siRNA重组质粒转染治疗组,转染胃癌细胞SGC-7901,采用RT-PCR法检测survivin mRNA的表达,Western blotting检测蛋白表达,观察重组质粒对其转染的SCG-7901细胞survivin基因表达的影响;用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测量细胞生长情况;用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果:Western blotting、RT-PCR结果证实转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1的SCG-7901细胞survivin蛋白质及mRNA抑制率(78.25%及88.75%)均高于脂质体对照组(5%及2%)和空质粒对照组(1%及6%) (P<0.01);转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-2的SCG-7901细胞survivin蛋白质及mRNA抑制率(42%及77%)也均高于脂质体对照组和空质粒对照组(P<0.01);MTT法检测结果显示转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1组细胞体外生长的抑制率(64%)高于空质粒对照组(11%) (P<0.01);流式细胞术检测的转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1组细胞凋亡率(21.20±3.21)高于脂质体对照组(0.830±0.001)和空质粒对照组(1.98±0.67) (P<0.01).结论:重组质粒pGCsilencerU6/GFP/survivin-siRNA可抑制胃癌细胞中survivin的表达,并抑制胃癌细胞生长,促进其凋亡.
목적:탐토siRNA침묵survivin기인표체대위암세포생장적억제작용급기궤제,위위암급survivin양성종류적치료제공이론의거.방법:침대survivin mRNA서렬설계합성편마siRNA적DNA모판,구건2개중조질립pGCsileneerU6/GFP/survivin siRNA-1화-2;실험분위지질체대조、공질립전염대조급survivin siRNA중조질립전염치료조,전염위암세포SGC-7901,채용RT-PCR법검측survivin mRNA적표체,Western blotting검측단백표체,관찰중조질립대기전염적SCG-7901세포survivin기인표체적영향;용사갑기우담서염(MTT)법측량세포생장정황;용류식세포술검측세포조망정황.결과:Western blotting、RT-PCR결과증실전염중조질립pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1적SCG-7901세포survivin단백질급mRNA억제솔(78.25%급88.75%)균고우지질체대조조(5%급2%)화공질립대조조(1%급6%) (P<0.01);전염중조질립pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-2적SCG-7901세포survivin단백질급mRNA억제솔(42%급77%)야균고우지질체대조조화공질립대조조(P<0.01);MTT법검측결과현시전염중조질립pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1조세포체외생장적억제솔(64%)고우공질립대조조(11%) (P<0.01);류식세포술검측적전염중조질립pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1조세포조망솔(21.20±3.21)고우지질체대조조(0.830±0.001)화공질립대조조(1.98±0.67) (P<0.01).결론:중조질립pGCsilencerU6/GFP/survivin-siRNA가억제위암세포중survivin적표체,병억제위암세포생장,촉진기조망.