中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2009年
2期
104-110
,共7页
胡智兴%耿菊敏%周轶平%罗敏%梁道明
鬍智興%耿菊敏%週軼平%囉敏%樑道明
호지흥%경국민%주질평%라민%량도명
肝细胞生长因子%神经干细胞%过氧化氢%细胞凋亡%1-磷脂酰肌醇3-激酶%蛋白激酶B%蛋白,Bcl-2%蛋白,Bax
肝細胞生長因子%神經榦細胞%過氧化氫%細胞凋亡%1-燐脂酰肌醇3-激酶%蛋白激酶B%蛋白,Bcl-2%蛋白,Bax
간세포생장인자%신경간세포%과양화경%세포조망%1-린지선기순3-격매%단백격매B%단백,Bcl-2%단백,Bax
目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对神经干细胞(NSC)凋亡的保护作用及其作用机制,为HGF用于NSC移植提供实验基础.方法 分离培养大鼠NSC.细胞分为正常对照、模型(H2O2 100 μmol·L-1)、HGF+H2O2(HGF 15, 30及60 μg·L-1预处理24 h后,再加入H2O2 100 μmol·L-1处理4 h),LY294002(PI3K/Akt通路抑制剂)+HGF+ H2O2(先加入LY294002 20 μmol·L-1处理30 min,再加入HGF 60 μg·L-1处理24 h,最后再加入100 μmol·L-1 H2O2培养4 h)组.MTT法检测细胞存活率;TUNEL法检测细胞凋亡率;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性;Western印迹分析Bcl-2, Bax蛋白表达.结果 MTT检测发现,随着HGF浓度的增加,NSC细胞的存活率也增加.与模型组[(63.5±2.4)%]比较,HGF 15, 30及60 μg·L-1预处理组细胞存活率明显升高[(79.1±7.5)%,(83.8±6.1)%和(86.6±8.2)%;n=3,P<0.05].TUNEL法检测发现,HGF预处理组凋亡细胞明显减少,模型组的凋亡率为(43.5±6.2)%,HGF预处理组则分别为(34.2±8.6)%,(21.7±3.8)%及(19.4±4.0)%.Caspase-3活性检测表明,与模型组相比,HGF预处理组细胞caspase-3活性降低.Western印迹分析结果显示,与模型组比较,HGF预处理使细胞的Bcl-2蛋白表达升高,但Bax蛋白表达不受影响;HGF的抗凋亡效应可被PI3K/Akt通道阻滞剂LY294002阻断.结论 HGF可减轻H2O2所诱导的大鼠NSC凋亡,且呈一定的浓度依赖关系, 其作用机制可能与NSC的PI3K/Akt通路激活和Bcl-2表达增强有关.
目的 研究肝細胞生長因子(HGF)對神經榦細胞(NSC)凋亡的保護作用及其作用機製,為HGF用于NSC移植提供實驗基礎.方法 分離培養大鼠NSC.細胞分為正常對照、模型(H2O2 100 μmol·L-1)、HGF+H2O2(HGF 15, 30及60 μg·L-1預處理24 h後,再加入H2O2 100 μmol·L-1處理4 h),LY294002(PI3K/Akt通路抑製劑)+HGF+ H2O2(先加入LY294002 20 μmol·L-1處理30 min,再加入HGF 60 μg·L-1處理24 h,最後再加入100 μmol·L-1 H2O2培養4 h)組.MTT法檢測細胞存活率;TUNEL法檢測細胞凋亡率;比色法檢測半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶(caspase)-3活性;Western印跡分析Bcl-2, Bax蛋白錶達.結果 MTT檢測髮現,隨著HGF濃度的增加,NSC細胞的存活率也增加.與模型組[(63.5±2.4)%]比較,HGF 15, 30及60 μg·L-1預處理組細胞存活率明顯升高[(79.1±7.5)%,(83.8±6.1)%和(86.6±8.2)%;n=3,P<0.05].TUNEL法檢測髮現,HGF預處理組凋亡細胞明顯減少,模型組的凋亡率為(43.5±6.2)%,HGF預處理組則分彆為(34.2±8.6)%,(21.7±3.8)%及(19.4±4.0)%.Caspase-3活性檢測錶明,與模型組相比,HGF預處理組細胞caspase-3活性降低.Western印跡分析結果顯示,與模型組比較,HGF預處理使細胞的Bcl-2蛋白錶達升高,但Bax蛋白錶達不受影響;HGF的抗凋亡效應可被PI3K/Akt通道阻滯劑LY294002阻斷.結論 HGF可減輕H2O2所誘導的大鼠NSC凋亡,且呈一定的濃度依賴關繫, 其作用機製可能與NSC的PI3K/Akt通路激活和Bcl-2錶達增彊有關.
목적 연구간세포생장인자(HGF)대신경간세포(NSC)조망적보호작용급기작용궤제,위HGF용우NSC이식제공실험기출.방법 분리배양대서NSC.세포분위정상대조、모형(H2O2 100 μmol·L-1)、HGF+H2O2(HGF 15, 30급60 μg·L-1예처리24 h후,재가입H2O2 100 μmol·L-1처리4 h),LY294002(PI3K/Akt통로억제제)+HGF+ H2O2(선가입LY294002 20 μmol·L-1처리30 min,재가입HGF 60 μg·L-1처리24 h,최후재가입100 μmol·L-1 H2O2배양4 h)조.MTT법검측세포존활솔;TUNEL법검측세포조망솔;비색법검측반광안산천동안산단백매(caspase)-3활성;Western인적분석Bcl-2, Bax단백표체.결과 MTT검측발현,수착HGF농도적증가,NSC세포적존활솔야증가.여모형조[(63.5±2.4)%]비교,HGF 15, 30급60 μg·L-1예처리조세포존활솔명현승고[(79.1±7.5)%,(83.8±6.1)%화(86.6±8.2)%;n=3,P<0.05].TUNEL법검측발현,HGF예처리조조망세포명현감소,모형조적조망솔위(43.5±6.2)%,HGF예처리조칙분별위(34.2±8.6)%,(21.7±3.8)%급(19.4±4.0)%.Caspase-3활성검측표명,여모형조상비,HGF예처리조세포caspase-3활성강저.Western인적분석결과현시,여모형조비교,HGF예처리사세포적Bcl-2단백표체승고,단Bax단백표체불수영향;HGF적항조망효응가피PI3K/Akt통도조체제LY294002조단.결론 HGF가감경H2O2소유도적대서NSC조망,차정일정적농도의뢰관계, 기작용궤제가능여NSC적PI3K/Akt통로격활화Bcl-2표체증강유관.
