华中科技大学学报(医学版)
華中科技大學學報(醫學版)
화중과기대학학보(의학판)
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2009年
4期
481-485
,共5页
庞然%张淑玲%赵雷%刘双林%董继华%叶翩
龐然%張淑玲%趙雷%劉雙林%董繼華%葉翩
방연%장숙령%조뢰%류쌍림%동계화%협편
蛇莓%RAW264.7细胞系%核因子-κB%炎症介质%血红素氧合酶-1
蛇莓%RAW264.7細胞繫%覈因子-κB%炎癥介質%血紅素氧閤酶-1
사매%RAW264.7세포계%핵인자-κB%염증개질%혈홍소양합매-1
目的 研究蛇莓乙醇提取物在体外的抗炎作用,初步探讨其抗炎机制.方法 通过脂多糖(LPS)干预RAW264.7巨噬细胞系建立炎症细胞模型,ELISA法检测上清液中TNF-α、NO的分泌量,实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、iNOS、血红素氧合酶1(HO-1)的基因表达,Western blot法测定HO-1的蛋白表达量,免疫细胞化学法检验核因子-κB(NF-κB)的表达及分布变化.结果 蛇莓提取物干预后细胞所分泌的炎症介质(TNF-α和NO)与炎症模型组相比均显著降低(均P<0.01),并存在剂量依赖关系;实时荧光定量RT-PCR结果显示蛇莓提取物干预后细胞TNF-α、iN-OS的mRNA表达水平显著降低,HO-1的mRNA表达水平明显升高,差异均有统计学意义,也存在剂量依赖关系;Western blot结果显示药物干预后HO-1的蛋白表达水平明显升高(P<0.01);免疫细胞化学法结果显示仅有LPS干预时,NF-κB表达增强且集中分布在细胞核,而药物干预时,NF-κB多分布在胞质.结论 蛇莓提取物通过抑制NF-κB的激活,下调巨噬细胞表达炎症介质,同时促进HO-1的释放而发挥一定的抗炎作用.
目的 研究蛇莓乙醇提取物在體外的抗炎作用,初步探討其抗炎機製.方法 通過脂多糖(LPS)榦預RAW264.7巨噬細胞繫建立炎癥細胞模型,ELISA法檢測上清液中TNF-α、NO的分泌量,實時熒光定量RT-PCR法檢測TNF-α、iNOS、血紅素氧閤酶1(HO-1)的基因錶達,Western blot法測定HO-1的蛋白錶達量,免疫細胞化學法檢驗覈因子-κB(NF-κB)的錶達及分佈變化.結果 蛇莓提取物榦預後細胞所分泌的炎癥介質(TNF-α和NO)與炎癥模型組相比均顯著降低(均P<0.01),併存在劑量依賴關繫;實時熒光定量RT-PCR結果顯示蛇莓提取物榦預後細胞TNF-α、iN-OS的mRNA錶達水平顯著降低,HO-1的mRNA錶達水平明顯升高,差異均有統計學意義,也存在劑量依賴關繫;Western blot結果顯示藥物榦預後HO-1的蛋白錶達水平明顯升高(P<0.01);免疫細胞化學法結果顯示僅有LPS榦預時,NF-κB錶達增彊且集中分佈在細胞覈,而藥物榦預時,NF-κB多分佈在胞質.結論 蛇莓提取物通過抑製NF-κB的激活,下調巨噬細胞錶達炎癥介質,同時促進HO-1的釋放而髮揮一定的抗炎作用.
목적 연구사매을순제취물재체외적항염작용,초보탐토기항염궤제.방법 통과지다당(LPS)간예RAW264.7거서세포계건립염증세포모형,ELISA법검측상청액중TNF-α、NO적분비량,실시형광정량RT-PCR법검측TNF-α、iNOS、혈홍소양합매1(HO-1)적기인표체,Western blot법측정HO-1적단백표체량,면역세포화학법검험핵인자-κB(NF-κB)적표체급분포변화.결과 사매제취물간예후세포소분비적염증개질(TNF-α화NO)여염증모형조상비균현저강저(균P<0.01),병존재제량의뢰관계;실시형광정량RT-PCR결과현시사매제취물간예후세포TNF-α、iN-OS적mRNA표체수평현저강저,HO-1적mRNA표체수평명현승고,차이균유통계학의의,야존재제량의뢰관계;Western blot결과현시약물간예후HO-1적단백표체수평명현승고(P<0.01);면역세포화학법결과현시부유LPS간예시,NF-κB표체증강차집중분포재세포핵,이약물간예시,NF-κB다분포재포질.결론 사매제취물통과억제NF-κB적격활,하조거서세포표체염증개질,동시촉진HO-1적석방이발휘일정적항염작용.