CAJ | 학술논문

目的探讨一种新型蛋白质锚定技术与人肿瘤坏死因子α(hTNF-α)相结合在小鼠表浅膀胱癌治疗中的作用.方法将120只雌性C57BL/6j小鼠分为5组:正常未处理组(空白对照组)、PBS对照组、可溶hTNF-α治疗组、SA-GFP锚定组、SA-hTNF-α锚定治疗组,每组22只小鼠.建立小鼠正位表浅膀胱癌模型,24 h后,将小鼠膀胱内膜生物素化,继而将hTNF-α融合蛋白灌注人小鼠膀胱中.每4 d重复膀胱灌注锚定治疗1次,共6次.免疫组化检测SA-hTNF-α融合蛋白在生物素化的小鼠膀胱黏膜的存留时间及膀胱黏膜和肿瘤组织中CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞的分布,观察肿瘤生长情况及小鼠的生存期.检测肿瘤特异性淋巴细胞的杀伤活性.用MB49细胞再次攻击对SA-hTNF-α融合蛋白治疗有效的小鼠,观察肿瘤生长情况及小鼠的存活期.结果免疫组化显示:SA-hTNF-α融合蛋白可以在膀胱黏膜表面上稳定存留7d;MB49肿瘤细胞膀胱内种植后第60天,SA-hTNF-α锚定治疗组有18只小鼠存活(18/22),其中9只小鼠体外无触及肿瘤;PBS组全部死亡.对9只无瘤存活的小鼠再次用MB49细胞皮下攻击,60d后5只小鼠仍存活(5/9),与对照组有显著性差异(P<0.05).膀胱癌病灶中CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞,SA-hTNF-α锚定治疗组较PBS对照组明显增多(P<0.05).SA.hTNF-α锚定治疗组小鼠的杀伤效应明显强于正常组小鼠(P<0.05).结论 SA-hTNF-α稳定的原位锚定于小鼠膀胱黏膜表面,可有效抑制小鼠表浅膀胱癌进展,显著延长荷瘤小鼠的生存时间,有效抵抗同源肿瘤细胞的再次攻击.
목적 탐토일충신형단백질묘정기술여인종류배사인자α(hTNF-α)상결합재소서표천방광암치료중적작용.방법 장120지자성C57BL/6j소서분위5조:정상미처리조(공백대조조)、PBS대조조、가용hTNF-α치료조、SA-GFP묘정조、SA-hTNF-α묘정치료조,매조22지소서.건립소서정위표천방광암모형,24 h후,장소서방광내막생물소화,계이장hTNF-α융합단백관주인소서방광중.매4 d중복방광관주묘정치료1차,공6차.면역조화검측SA-hTNF-α융합단백재생물소화적소서방광점막적존류시간급방광점막화종류조직중CD4+T림파세포급CD8+T림파세포적분포,관찰종류생장정황급소서적생존기.검측종류특이성림파세포적살상활성.용MB49세포재차공격대SA-hTNF-α융합단백치료유효적소서,관찰종류생장정황급소서적존활기.결과 면역조화현시:SA-hTNF-α융합단백가이재방광점막표면상은정존류7d;MB49종류세포방광내충식후제60천,SA-hTNF-α묘정치료조유18지소서존활(18/22),기중9지소서체외무촉급종류;PBS조전부사망.대9지무류존활적소서재차용MB49세포피하공격,60d후5지소서잉존활(5/9),여대조조유현저성차이(P<0.05).방광암병조중CD4+T림파세포급CD8+T림파세포,SA-hTNF-α묘정치료조교PBS대조조명현증다(P<0.05).SA.hTNF-α묘정치료조소서적살상효응명현강우정상조소서(P<0.05).결론 SA-hTNF-α은정적원위묘정우소서방광점막표면,가유효억제소서표천방광암진전,현저연장하류소서적생존시간,유효저항동원종류세포적재차공격.