西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2010年
12期
10-16
,共7页
李文雯%张军林%雷安民%钱永华
李文雯%張軍林%雷安民%錢永華
리문문%장군림%뢰안민%전영화
家蚕抗菌肽Cecropin B%乳糖%诱导表达
傢蠶抗菌肽Cecropin B%乳糖%誘導錶達
가잠항균태Cecropin B%유당%유도표체
根据家蚕抗菌肽Cecropin B的氨基酸序列,按大肠杆菌基因偏爱密码子,人工合成改造过的Cecropin B基因.将改造过的Cecropin B基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-41a中,构建了融合蛋白表达载体pET41a-cecB,转化大肠杆菌BL21 (DE3),得到表达Cecropin B的大肠杆菌工程菌株.通过SDS-PAGE分析,研究了用乳糖代替IPTG诱导大肠杆菌BL21表达家蚕抗菌肽Cecropin B的诱导条件,得到乳糖的最佳用量为0.25 mmol/L、诱导起始浓度为OD 1.0、诱导时间为5 h.最终Cecropin B的表达量可占细胞总蛋白的17.1%.为乳糖作为诱导剂应用于大肠杆菌生产重组家蚕抗菌肽提供了参考依据.
根據傢蠶抗菌肽Cecropin B的氨基痠序列,按大腸桿菌基因偏愛密碼子,人工閤成改造過的Cecropin B基因.將改造過的Cecropin B基因剋隆到大腸桿菌錶達載體pET-41a中,構建瞭融閤蛋白錶達載體pET41a-cecB,轉化大腸桿菌BL21 (DE3),得到錶達Cecropin B的大腸桿菌工程菌株.通過SDS-PAGE分析,研究瞭用乳糖代替IPTG誘導大腸桿菌BL21錶達傢蠶抗菌肽Cecropin B的誘導條件,得到乳糖的最佳用量為0.25 mmol/L、誘導起始濃度為OD 1.0、誘導時間為5 h.最終Cecropin B的錶達量可佔細胞總蛋白的17.1%.為乳糖作為誘導劑應用于大腸桿菌生產重組傢蠶抗菌肽提供瞭參攷依據.
근거가잠항균태Cecropin B적안기산서렬,안대장간균기인편애밀마자,인공합성개조과적Cecropin B기인.장개조과적Cecropin B기인극륭도대장간균표체재체pET-41a중,구건료융합단백표체재체pET41a-cecB,전화대장간균BL21 (DE3),득도표체Cecropin B적대장간균공정균주.통과SDS-PAGE분석,연구료용유당대체IPTG유도대장간균BL21표체가잠항균태Cecropin B적유도조건,득도유당적최가용량위0.25 mmol/L、유도기시농도위OD 1.0、유도시간위5 h.최종Cecropin B적표체량가점세포총단백적17.1%.위유당작위유도제응용우대장간균생산중조가잠항균태제공료삼고의거.