中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2011年
2期
186-190
,共5页
陶玉倩%田青%叶文华%杨颖%张赛%陈淑英
陶玉倩%田青%葉文華%楊穎%張賽%陳淑英
도옥천%전청%협문화%양영%장새%진숙영
大脑皮层神经元%氧糖剥夺%Semaphorin 3A%Neuropilin-1%轴突/损伤
大腦皮層神經元%氧糖剝奪%Semaphorin 3A%Neuropilin-1%軸突/損傷
대뇌피층신경원%양당박탈%Semaphorin 3A%Neuropilin-1%축돌/손상
[目的]研究体外培养的大鼠皮层神经元氧糖剥夺(OGD)处理后,Sema3A、Nrp-1 mRNA的表达变化及其与神经元轴突网络损伤的关系.[方法]体外培养新生SD大鼠皮层神经元,随机分为正常对照组和OGD处理组:噻唑蓝(MTT)比色法测定神经元活性;βⅢ-tubulin免疫荧光染色观察轴突网络形态学变化,Real-time PCR检测Sema3A及其受体Nrp-1 mRNA的表达;βⅢ-tubulin免疫荧光染色观察外源性Sema3A蛋白对神经元轴突生长的影响.[结果]随着OGD时间的延长,神经元活性呈梯度下降(P<0.01);OGD处理4 h可导致神经元轴突网络发生明显的崩解损伤;OGD处理4 h、6 h后,Sema3A mRNA表达水平显著上调(P<0.01);OGD处理6 h后,Nrp-1 mRNA表达水平显著上调(P<0.01);经外源性Sema3A(5 mg/mL)蛋白处理,可观察到神经元的轴突生长及延伸受到明显抑制(P<0.01).[结论] OGD处理可诱导Sema3A、Nrp-1 mRNA表达上调,并且外源性Sema3A蛋白可在体外抑制轴突生长,提示Sema3A/Nrp-1 可能参与OGD处理后轴突网络崩解、细胞凋亡等病理生理过程.
[目的]研究體外培養的大鼠皮層神經元氧糖剝奪(OGD)處理後,Sema3A、Nrp-1 mRNA的錶達變化及其與神經元軸突網絡損傷的關繫.[方法]體外培養新生SD大鼠皮層神經元,隨機分為正常對照組和OGD處理組:噻唑藍(MTT)比色法測定神經元活性;βⅢ-tubulin免疫熒光染色觀察軸突網絡形態學變化,Real-time PCR檢測Sema3A及其受體Nrp-1 mRNA的錶達;βⅢ-tubulin免疫熒光染色觀察外源性Sema3A蛋白對神經元軸突生長的影響.[結果]隨著OGD時間的延長,神經元活性呈梯度下降(P<0.01);OGD處理4 h可導緻神經元軸突網絡髮生明顯的崩解損傷;OGD處理4 h、6 h後,Sema3A mRNA錶達水平顯著上調(P<0.01);OGD處理6 h後,Nrp-1 mRNA錶達水平顯著上調(P<0.01);經外源性Sema3A(5 mg/mL)蛋白處理,可觀察到神經元的軸突生長及延伸受到明顯抑製(P<0.01).[結論] OGD處理可誘導Sema3A、Nrp-1 mRNA錶達上調,併且外源性Sema3A蛋白可在體外抑製軸突生長,提示Sema3A/Nrp-1 可能參與OGD處理後軸突網絡崩解、細胞凋亡等病理生理過程.
[목적]연구체외배양적대서피층신경원양당박탈(OGD)처리후,Sema3A、Nrp-1 mRNA적표체변화급기여신경원축돌망락손상적관계.[방법]체외배양신생SD대서피층신경원,수궤분위정상대조조화OGD처리조:새서람(MTT)비색법측정신경원활성;βⅢ-tubulin면역형광염색관찰축돌망락형태학변화,Real-time PCR검측Sema3A급기수체Nrp-1 mRNA적표체;βⅢ-tubulin면역형광염색관찰외원성Sema3A단백대신경원축돌생장적영향.[결과]수착OGD시간적연장,신경원활성정제도하강(P<0.01);OGD처리4 h가도치신경원축돌망락발생명현적붕해손상;OGD처리4 h、6 h후,Sema3A mRNA표체수평현저상조(P<0.01);OGD처리6 h후,Nrp-1 mRNA표체수평현저상조(P<0.01);경외원성Sema3A(5 mg/mL)단백처리,가관찰도신경원적축돌생장급연신수도명현억제(P<0.01).[결론] OGD처리가유도Sema3A、Nrp-1 mRNA표체상조,병차외원성Sema3A단백가재체외억제축돌생장,제시Sema3A/Nrp-1 가능삼여OGD처리후축돌망락붕해、세포조망등병리생리과정.
