重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2011年
8期
907-910
,共4页
靳志栋%何永林%徐蕾%佘茜%张丹%张壮苗%杨春
靳誌棟%何永林%徐蕾%佘茜%張丹%張壯苗%楊春
근지동%하영림%서뢰%사천%장단%장장묘%양춘
Mtb%PPE68%巨噬细胞
Mtb%PPE68%巨噬細胞
Mtb%PPE68%거서세포
目的:构建结核分枝杆菌(Mycobacteriatuberculosis,Mtb)PPE68基因的真核表达质粒,观察PPE68基因在小鼠巨噬细胞株RAW264.7中的表达.方法:将MtbPPE68基因克隆亚至真核表达质粒pBudCE4.1中,构建真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68.以真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68体外转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,通过RT-PCR及Western blot法分别在转录水平及翻译水平检测PPE68基因的表达.结果:重组表达质粒经双酶切所切下的片段大小与理论值相符,测序结果与Genbank注录的PPE68基因序列一致.重组质粒瞬时转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7,用RT-PCR及Western blot法分别在转录水平及翻译水平检测PPE68基因的表达.结论:成功构建了PPE68基因的重组真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68,并在小鼠巨噬细胞株RAW264.7中得到了成功表达.为对其免疫原性、免疫反应性及免疫保护作用的进一步研究奠定了基础.
目的:構建結覈分枝桿菌(Mycobacteriatuberculosis,Mtb)PPE68基因的真覈錶達質粒,觀察PPE68基因在小鼠巨噬細胞株RAW264.7中的錶達.方法:將MtbPPE68基因剋隆亞至真覈錶達質粒pBudCE4.1中,構建真覈錶達質粒pBudCE4.1-PPE68.以真覈錶達質粒pBudCE4.1-PPE68體外轉染小鼠巨噬細胞株RAW264.7細胞,通過RT-PCR及Western blot法分彆在轉錄水平及翻譯水平檢測PPE68基因的錶達.結果:重組錶達質粒經雙酶切所切下的片段大小與理論值相符,測序結果與Genbank註錄的PPE68基因序列一緻.重組質粒瞬時轉染小鼠巨噬細胞株RAW264.7,用RT-PCR及Western blot法分彆在轉錄水平及翻譯水平檢測PPE68基因的錶達.結論:成功構建瞭PPE68基因的重組真覈錶達質粒pBudCE4.1-PPE68,併在小鼠巨噬細胞株RAW264.7中得到瞭成功錶達.為對其免疫原性、免疫反應性及免疫保護作用的進一步研究奠定瞭基礎.
목적:구건결핵분지간균(Mycobacteriatuberculosis,Mtb)PPE68기인적진핵표체질립,관찰PPE68기인재소서거서세포주RAW264.7중적표체.방법:장MtbPPE68기인극륭아지진핵표체질립pBudCE4.1중,구건진핵표체질립pBudCE4.1-PPE68.이진핵표체질립pBudCE4.1-PPE68체외전염소서거서세포주RAW264.7세포,통과RT-PCR급Western blot법분별재전록수평급번역수평검측PPE68기인적표체.결과:중조표체질립경쌍매절소절하적편단대소여이론치상부,측서결과여Genbank주록적PPE68기인서렬일치.중조질립순시전염소서거서세포주RAW264.7,용RT-PCR급Western blot법분별재전록수평급번역수평검측PPE68기인적표체.결론:성공구건료PPE68기인적중조진핵표체질립pBudCE4.1-PPE68,병재소서거서세포주RAW264.7중득도료성공표체.위대기면역원성、면역반응성급면역보호작용적진일보연구전정료기출.
