中国马铃薯
中國馬鈴藷
중국마령서
CHINESE POTATO
2011年
3期
129-134
,共6页
转基因马铃薯%多重PCR%变性高效液相色谱%筛选检测%品系鉴定
轉基因馬鈴藷%多重PCR%變性高效液相色譜%篩選檢測%品繫鑒定
전기인마령서%다중PCR%변성고효액상색보%사선검측%품계감정
以EH92-527-1转基因马铃薯为试材,应用多重PCR技术同时扩增马铃薯的内源基因(UGPase)和外源基因(NOS终止子、NPTⅡ结构基因和EH92-527-1品系特异基因),将扩增产物在DHPLC非变性条件下分离,分析几个基因扩增的结果;将模板进行稀释,确定了方法的检测灵敏度,并与凝胶电泳结果相比较,建立了马铃薯转基因成分筛选检测及品系鉴定的多重PCR-变性高效液相色谱(DHPLC)方法.试验结果表明,该方法能够同时筛选检测转基因马铃薯的四个内、外源基因,且与凝胶成像相比,有更好的检测灵敏度,可达到1 ng/μL.本文首次建立的马铃薯多重PCR-DHPLC检测方法,能够高通量快速准确的检测马铃薯中的转基因成分及对品系进行鉴定.
以EH92-527-1轉基因馬鈴藷為試材,應用多重PCR技術同時擴增馬鈴藷的內源基因(UGPase)和外源基因(NOS終止子、NPTⅡ結構基因和EH92-527-1品繫特異基因),將擴增產物在DHPLC非變性條件下分離,分析幾箇基因擴增的結果;將模闆進行稀釋,確定瞭方法的檢測靈敏度,併與凝膠電泳結果相比較,建立瞭馬鈴藷轉基因成分篩選檢測及品繫鑒定的多重PCR-變性高效液相色譜(DHPLC)方法.試驗結果錶明,該方法能夠同時篩選檢測轉基因馬鈴藷的四箇內、外源基因,且與凝膠成像相比,有更好的檢測靈敏度,可達到1 ng/μL.本文首次建立的馬鈴藷多重PCR-DHPLC檢測方法,能夠高通量快速準確的檢測馬鈴藷中的轉基因成分及對品繫進行鑒定.
이EH92-527-1전기인마령서위시재,응용다중PCR기술동시확증마령서적내원기인(UGPase)화외원기인(NOS종지자、NPTⅡ결구기인화EH92-527-1품계특이기인),장확증산물재DHPLC비변성조건하분리,분석궤개기인확증적결과;장모판진행희석,학정료방법적검측령민도,병여응효전영결과상비교,건립료마령서전기인성분사선검측급품계감정적다중PCR-변성고효액상색보(DHPLC)방법.시험결과표명,해방법능구동시사선검측전기인마령서적사개내、외원기인,차여응효성상상비,유경호적검측령민도,가체도1 ng/μL.본문수차건립적마령서다중PCR-DHPLC검측방법,능구고통량쾌속준학적검측마령서중적전기인성분급대품계진행감정.
