中国真菌学杂志
中國真菌學雜誌
중국진균학잡지
CHINESE JOURNAL OF MYCOLOGY
2011年
5期
261-266
,共6页
赵作涛%李丽丽%王晓阳%万喆%陈伟%李若瑜
趙作濤%李麗麗%王曉暘%萬喆%陳偉%李若瑜
조작도%리려려%왕효양%만철%진위%리약유
曲霉%毛霉%PCR%反向线点杂交
麯黴%毛黴%PCR%反嚮線點雜交
곡매%모매%PCR%반향선점잡교
目的 应用反向线点杂交技术(reverse line blot hybridization,RLB)快速鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌.方法 收集我院真菌和真菌病研究中心保存的5种曲霉菌(烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、构巢曲霉)和7种毛霉目真菌(冻土毛霉菌、总状毛霉菌、卷枝毛霉菌、少根根霉、小孢根霉、微小根毛霉、伞状犁头霉),共计98株菌株.利用真菌通用引物ITS1和ITS4对菌株进行PCR扩增,用12个真菌种特异性探针与扩增后产物进行反向线点杂交.将RLB结果与真菌传统形态学鉴定结果、ITS区DNA测序结果进行比较.结果 RLB可以正确鉴定98株实验菌株,与形态学方法和ITS区测序方法鉴定结果100％一致,种特异性探针之间未见交叉杂交,显示出该方法的高度敏感性和特异性.8株阴性对照菌株(白念珠菌、茄病镰刀菌、尖端赛多孢、马尔尼菲青霉、疣状瓶霉、棒曲霉、日本曲霉以及雅致小克银汉霉),使用RLB方法无法鉴定.通过烟曲霉基因组DNA浓度10倍倍比稀释法验证RLB的敏感性为1.8×10-3 ng/μL.结论 RLB技术为实验室早期快速诊断、鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌提供参考.
目的 應用反嚮線點雜交技術(reverse line blot hybridization,RLB)快速鑒定臨床常見的麯黴屬和毛黴目真菌.方法 收集我院真菌和真菌病研究中心保存的5種麯黴菌(煙麯黴、黃麯黴、黑麯黴、土麯黴、構巢麯黴)和7種毛黴目真菌(凍土毛黴菌、總狀毛黴菌、捲枝毛黴菌、少根根黴、小孢根黴、微小根毛黴、傘狀犛頭黴),共計98株菌株.利用真菌通用引物ITS1和ITS4對菌株進行PCR擴增,用12箇真菌種特異性探針與擴增後產物進行反嚮線點雜交.將RLB結果與真菌傳統形態學鑒定結果、ITS區DNA測序結果進行比較.結果 RLB可以正確鑒定98株實驗菌株,與形態學方法和ITS區測序方法鑒定結果100％一緻,種特異性探針之間未見交扠雜交,顯示齣該方法的高度敏感性和特異性.8株陰性對照菌株(白唸珠菌、茄病鐮刀菌、尖耑賽多孢、馬爾尼菲青黴、疣狀瓶黴、棒麯黴、日本麯黴以及雅緻小剋銀漢黴),使用RLB方法無法鑒定.通過煙麯黴基因組DNA濃度10倍倍比稀釋法驗證RLB的敏感性為1.8×10-3 ng/μL.結論 RLB技術為實驗室早期快速診斷、鑒定臨床常見的麯黴屬和毛黴目真菌提供參攷.
목적 응용반향선점잡교기술(reverse line blot hybridization,RLB)쾌속감정림상상견적곡매속화모매목진균.방법 수집아원진균화진균병연구중심보존적5충곡매균(연곡매、황곡매、흑곡매、토곡매、구소곡매)화7충모매목진균(동토모매균、총상모매균、권지모매균、소근근매、소포근매、미소근모매、산상리두매),공계98주균주.이용진균통용인물ITS1화ITS4대균주진행PCR확증,용12개진균충특이성탐침여확증후산물진행반향선점잡교.장RLB결과여진균전통형태학감정결과、ITS구DNA측서결과진행비교.결과 RLB가이정학감정98주실험균주,여형태학방법화ITS구측서방법감정결과100％일치,충특이성탐침지간미견교차잡교,현시출해방법적고도민감성화특이성.8주음성대조균주(백념주균、가병렴도균、첨단새다포、마이니비청매、우상병매、봉곡매、일본곡매이급아치소극은한매),사용RLB방법무법감정.통과연곡매기인조DNA농도10배배비희석법험증RLB적민감성위1.8×10-3 ng/μL.결론 RLB기술위실험실조기쾌속진단、감정림상상견적곡매속화모매목진균제공삼고.
