现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2012年
2期
19-22
,共4页
尤崇革%李玉民%马克君%施鑫鹤%李菲菲%郜莉娜%呼志斌
尤崇革%李玉民%馬剋君%施鑫鶴%李菲菲%郜莉娜%呼誌斌
우숭혁%리옥민%마극군%시흠학%리비비%고리나%호지빈
高分辨熔解%单核苷酸多态性(SNP)%基因分型%荧光染料
高分辨鎔解%單覈苷痠多態性(SNP)%基因分型%熒光染料
고분변용해%단핵감산다태성(SNP)%기인분형%형광염료
目的 探讨高分辨熔解(high resolution melting,HRM)技术的常规化检测流程以及实验设计策略和具体操作要点.方法 以疾病关联SNP单位点IL1B-31和双位点IL6-597/-572的检测为例,分别从核酸提取,引物设计、验证和有效性评价以及酶系统和HRM染料的选择与匹配等方面进行最优策略与流程的探索.结果成功建立了单位点IL1B-31和双位点IL6-597/-572的PCR-HRM检测方法并得到验证.柱提基因组DNA模板、特异高效HRM引物和应用热启动酶是PCR-HRM检测方法成功建立的关键,尤其是Beacon designer,uMelt和mfold等工具软件的应用.结论 HRM技术是一种适合疾病关联SNP验证和临床分子诊断的高通量、低成本、易操作、闭管均相检测新方法.
目的 探討高分辨鎔解(high resolution melting,HRM)技術的常規化檢測流程以及實驗設計策略和具體操作要點.方法 以疾病關聯SNP單位點IL1B-31和雙位點IL6-597/-572的檢測為例,分彆從覈痠提取,引物設計、驗證和有效性評價以及酶繫統和HRM染料的選擇與匹配等方麵進行最優策略與流程的探索.結果成功建立瞭單位點IL1B-31和雙位點IL6-597/-572的PCR-HRM檢測方法併得到驗證.柱提基因組DNA模闆、特異高效HRM引物和應用熱啟動酶是PCR-HRM檢測方法成功建立的關鍵,尤其是Beacon designer,uMelt和mfold等工具軟件的應用.結論 HRM技術是一種適閤疾病關聯SNP驗證和臨床分子診斷的高通量、低成本、易操作、閉管均相檢測新方法.
목적 탐토고분변용해(high resolution melting,HRM)기술적상규화검측류정이급실험설계책략화구체조작요점.방법 이질병관련SNP단위점IL1B-31화쌍위점IL6-597/-572적검측위례,분별종핵산제취,인물설계、험증화유효성평개이급매계통화HRM염료적선택여필배등방면진행최우책략여류정적탐색.결과성공건립료단위점IL1B-31화쌍위점IL6-597/-572적PCR-HRM검측방법병득도험증.주제기인조DNA모판、특이고효HRM인물화응용열계동매시PCR-HRM검측방법성공건립적관건,우기시Beacon designer,uMelt화mfold등공구연건적응용.결론 HRM기술시일충괄합질병관련SNP험증화림상분자진단적고통량、저성본、역조작、폐관균상검측신방법.
