CAJ | 학술논문

[目的]为棉花抗黄萎病基因工程育种提供新的基因源.[方法]以海岛棉为材料,利用同源序列法和RACE技术克隆海岛棉中SAR途径的主要抗病信号元件NPR1(none expresser of PR gene)的全长cDNA序列.[结果]推导的氨基酸序列与已知NPR1的同源性较低(39%～57%),但在功能区的同源性较高(79.2%),GbNPR1蛋白中含有BTB和锚蛋白重复序列结构域,且在起始密码子上游存在2个W框.在拟南芥中,A.tNPR1起始密码子上游有3个W框,对诱导NPR1的表达和激活NPR1介导的植物防卫反应至关重要,锚蛋白重复序列则是NPR1实现其功能必不可少的.构建了组成型植物表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,转基因植株经PCR和Southern杂交检测,表明目的基因已整合到烟草基因组中.离体叶片接种法对转基因烟草进行抗病性鉴定,表明对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抗性有明显提高.转基因烟草经T1代遗传分析发现,基因以单拷贝插入.[结论]本研究得到的基因为海岛棉中NPR1的同源基因.
[목적]위면화항황위병기인공정육충제공신적기인원.[방법]이해도면위재료,이용동원서렬법화RACE기술극륭해도면중SAR도경적주요항병신호원건NPR1(none expresser of PR gene)적전장cDNA서렬.[결과]추도적안기산서렬여이지NPR1적동원성교저(39%～57%),단재공능구적동원성교고(79.2%),GbNPR1단백중함유BTB화묘단백중복서렬결구역,차재기시밀마자상유존재2개W광.재의남개중,A.tNPR1기시밀마자상유유3개W광,대유도NPR1적표체화격활NPR1개도적식물방위반응지관중요,묘단백중복서렬칙시NPR1실현기공능필불가소적.구건료조성형식물표체재체,통과농간균개도법도입연초,전기인식주경PCR화Southern잡교검측,표명목적기인이정합도연초기인조중.리체협편접충법대전기인연초진행항병성감정,표명대연초적성병균(Alternaria alternata)적항성유명현제고.전기인연초경T1대유전분석발현,기인이단고패삽입.[결론]본연구득도적기인위해도면중NPR1적동원기인.