畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2008年
1期
117-122
,共6页
冯亚玫%柳金雄%刘仪%陈秋生
馮亞玫%柳金雄%劉儀%陳鞦生
풍아매%류금웅%류의%진추생
肠Remak神经%P物质%RNA探针%原位杂交
腸Remak神經%P物質%RNA探針%原位雜交
장Remak신경%P물질%RNA탐침%원위잡교
应用RT-PCR方法从鸡脑中扩增P物质(Substance P,SP)基因片段,将其连接于pGM-T质粒并转化大肠杆菌,挑取阳性克隆,测序鉴定为目的片段.分别利用pGM-T质粒中T7和SP6启动子及T7和SP6RNA聚合酶,以线性化的SP/pGM-T为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针.通过原位杂交(in situ hybridization histochemistry,ISHH)技术,用新合成的探针探查SP-mRNA在鸡肠Remak神经(Intestinal nerve of Remak,INR)中的分布情况.结果表明,鸡INR中SP-mRNA阳性神经元数量众多,在空、回肠段和直肠段INR中的阳性细胞分别占总神经元的82.98%和98.01%.阳性细胞呈多突起的椭圆形或梭形,在INR神经节中较有规律地层状分布或成群出现,在神经节边缘分布更为密集,并且在节间束也有少量的阳性细胞分布.本研究从基因水平证明INR中大部分神经元有SP的mRNA转录,这些神经元作为外来的SP神经纤维可以支配到肠道和输卵管.
應用RT-PCR方法從鷄腦中擴增P物質(Substance P,SP)基因片段,將其連接于pGM-T質粒併轉化大腸桿菌,挑取暘性剋隆,測序鑒定為目的片段.分彆利用pGM-T質粒中T7和SP6啟動子及T7和SP6RNA聚閤酶,以線性化的SP/pGM-T為模闆轉錄閤成正、反義DIG標記RNA探針.通過原位雜交(in situ hybridization histochemistry,ISHH)技術,用新閤成的探針探查SP-mRNA在鷄腸Remak神經(Intestinal nerve of Remak,INR)中的分佈情況.結果錶明,鷄INR中SP-mRNA暘性神經元數量衆多,在空、迴腸段和直腸段INR中的暘性細胞分彆佔總神經元的82.98%和98.01%.暘性細胞呈多突起的橢圓形或梭形,在INR神經節中較有規律地層狀分佈或成群齣現,在神經節邊緣分佈更為密集,併且在節間束也有少量的暘性細胞分佈.本研究從基因水平證明INR中大部分神經元有SP的mRNA轉錄,這些神經元作為外來的SP神經纖維可以支配到腸道和輸卵管.
응용RT-PCR방법종계뇌중확증P물질(Substance P,SP)기인편단,장기련접우pGM-T질립병전화대장간균,도취양성극륭,측서감정위목적편단.분별이용pGM-T질립중T7화SP6계동자급T7화SP6RNA취합매,이선성화적SP/pGM-T위모판전록합성정、반의DIG표기RNA탐침.통과원위잡교(in situ hybridization histochemistry,ISHH)기술,용신합성적탐침탐사SP-mRNA재계장Remak신경(Intestinal nerve of Remak,INR)중적분포정황.결과표명,계INR중SP-mRNA양성신경원수량음다,재공、회장단화직장단INR중적양성세포분별점총신경원적82.98%화98.01%.양성세포정다돌기적타원형혹사형,재INR신경절중교유규률지층상분포혹성군출현,재신경절변연분포경위밀집,병차재절간속야유소량적양성세포분포.본연구종기인수평증명INR중대부분신경원유SP적mRNA전록,저사신경원작위외래적SP신경섬유가이지배도장도화수란관.
