武汉理工大学学报
武漢理工大學學報
무한리공대학학보
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY OF TECHNOLOGY
2008年
5期
58-61
,共4页
周灵德%闫玉华%袁琳%李世普
週靈德%閆玉華%袁琳%李世普
주령덕%염옥화%원림%리세보
大鼠骨粘连蛋白%表达载体构建%蛋白质纯化%生物活性分析
大鼠骨粘連蛋白%錶達載體構建%蛋白質純化%生物活性分析
대서골점련단백%표체재체구건%단백질순화%생물활성분석
将编码骨粘连蛋白(osteonectin, ON)全长的cDNA亚克隆入含tac启动子的表达质粒pGEX-KG中,构建了tac启动子控制的原核表达载体pGEX-KG/ON.转化大肠杆菌BL21 (DE3) pLysS,IPTG诱导3 h后表达量达到最高水平,约占菌体总蛋白10%,表达产物以可溶形式存在.通过硫酸铵分级沉淀、超滤膜分离、亲和层析得到骨粘连蛋白.实验证实蛋白有较强的Ca2+结合活性.
將編碼骨粘連蛋白(osteonectin, ON)全長的cDNA亞剋隆入含tac啟動子的錶達質粒pGEX-KG中,構建瞭tac啟動子控製的原覈錶達載體pGEX-KG/ON.轉化大腸桿菌BL21 (DE3) pLysS,IPTG誘導3 h後錶達量達到最高水平,約佔菌體總蛋白10%,錶達產物以可溶形式存在.通過硫痠銨分級沉澱、超濾膜分離、親和層析得到骨粘連蛋白.實驗證實蛋白有較彊的Ca2+結閤活性.
장편마골점련단백(osteonectin, ON)전장적cDNA아극륭입함tac계동자적표체질립pGEX-KG중,구건료tac계동자공제적원핵표체재체pGEX-KG/ON.전화대장간균BL21 (DE3) pLysS,IPTG유도3 h후표체량체도최고수평,약점균체총단백10%,표체산물이가용형식존재.통과류산안분급침정、초려막분리、친화층석득도골점련단백.실험증실단백유교강적Ca2+결합활성.
