中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
32期
6251-6256
,共6页
李志峰%陈钟%常仁安%何友梅
李誌峰%陳鐘%常仁安%何友梅
리지봉%진종%상인안%하우매
聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖%肝细胞生长因子%纳米粒子%载药%生物材料
聚乳痠-O-羧甲基殼聚糖%肝細胞生長因子%納米粒子%載藥%生物材料
취유산-O-최갑기각취당%간세포생장인자%납미입자%재약%생물재료
背景:肝细胞生长因子半衰期短,且不具有靶向性.成熟肝细胞体外大量培养及活力维持难度较大,严重制约肝细胞移植及生物人工肝的临床应用.目的:制备并表征载肝细胞生长因子的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,探讨其体外降解、释药行为及对培养大鼠肝细胞活力的影响.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-07/2008-01在南通大学肝胆外科研究所及南通大学江苏省神经再生重点实验室设计完成.材料:SD大鼠10只,肝细胞生长因子由英国Pepro Tech公司提供,聚乳酸由美国Sigma公司提供,O-羧甲基壳聚糖由上海伟康生物技术有限公司提供.方法:以聚乳酸和O-羧甲基壳聚糖为基质材料,采用超声波法制备聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,用低温磁力搅拌法制备载肝细胞生长因子的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子.用该载药纳米粒子进行原代人鼠肝细胞培养,并以/不加肝细胞生长因子的普通培养作为对照,采用CCK-8体外细胞增殖检测试还剂盒检测培养肝细胞活力.主要观察指标:观察该载药纳米粒子的结构、粒径及表面形貌,测定其粒径分砸和表面电位,动态监测降解过程中粒子表面形貌的变化、降解过程中质量的损失情况和降解介质的pH值变化情况.并进一步检测培养1周内肝细胞的活力.结果:载肝细胞生长因子的PLA-O-CMC纳米粒子呈球形,其平均粒径为140 nm,粒径分布指数为0.108,载药率为0.126 65%,包封率为76.32%,粒子表面电位为32.8 eV.该载药纳米粒子前24 h释药动力学方程为Q=148.426 6+189.049 3 t1/2(R=O.975 89),符合Huguchi方程:前30 d内释放动力学方程Q=1 086.289 66+58.239 38t(R=0.997 16),符合零级释放方程.载药纳米粒子组肝细胞活力明显高于普通培养组(P＜0.05).结论:实验成功制备并表征了载肝细胞生长因子的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,并证实其能够有效维持培养大鼠肝细胞的活力.
揹景:肝細胞生長因子半衰期短,且不具有靶嚮性.成熟肝細胞體外大量培養及活力維持難度較大,嚴重製約肝細胞移植及生物人工肝的臨床應用.目的:製備併錶徵載肝細胞生長因子的聚乳痠-O-羧甲基殼聚糖納米粒子,探討其體外降解、釋藥行為及對培養大鼠肝細胞活力的影響.設計、時間及地點:對比觀察實驗,于2006-07/2008-01在南通大學肝膽外科研究所及南通大學江囌省神經再生重點實驗室設計完成.材料:SD大鼠10隻,肝細胞生長因子由英國Pepro Tech公司提供,聚乳痠由美國Sigma公司提供,O-羧甲基殼聚糖由上海偉康生物技術有限公司提供.方法:以聚乳痠和O-羧甲基殼聚糖為基質材料,採用超聲波法製備聚乳痠-O-羧甲基殼聚糖納米粒子,用低溫磁力攪拌法製備載肝細胞生長因子的聚乳痠-O-羧甲基殼聚糖納米粒子.用該載藥納米粒子進行原代人鼠肝細胞培養,併以/不加肝細胞生長因子的普通培養作為對照,採用CCK-8體外細胞增殖檢測試還劑盒檢測培養肝細胞活力.主要觀察指標:觀察該載藥納米粒子的結構、粒徑及錶麵形貌,測定其粒徑分砸和錶麵電位,動態鑑測降解過程中粒子錶麵形貌的變化、降解過程中質量的損失情況和降解介質的pH值變化情況.併進一步檢測培養1週內肝細胞的活力.結果:載肝細胞生長因子的PLA-O-CMC納米粒子呈毬形,其平均粒徑為140 nm,粒徑分佈指數為0.108,載藥率為0.126 65%,包封率為76.32%,粒子錶麵電位為32.8 eV.該載藥納米粒子前24 h釋藥動力學方程為Q=148.426 6+189.049 3 t1/2(R=O.975 89),符閤Huguchi方程:前30 d內釋放動力學方程Q=1 086.289 66+58.239 38t(R=0.997 16),符閤零級釋放方程.載藥納米粒子組肝細胞活力明顯高于普通培養組(P＜0.05).結論:實驗成功製備併錶徵瞭載肝細胞生長因子的聚乳痠-O-羧甲基殼聚糖納米粒子,併證實其能夠有效維持培養大鼠肝細胞的活力.
배경:간세포생장인자반쇠기단,차불구유파향성.성숙간세포체외대량배양급활력유지난도교대,엄중제약간세포이식급생물인공간적림상응용.목적:제비병표정재간세포생장인자적취유산-O-최갑기각취당납미입자,탐토기체외강해、석약행위급대배양대서간세포활력적영향.설계、시간급지점:대비관찰실험,우2006-07/2008-01재남통대학간담외과연구소급남통대학강소성신경재생중점실험실설계완성.재료:SD대서10지,간세포생장인자유영국Pepro Tech공사제공,취유산유미국Sigma공사제공,O-최갑기각취당유상해위강생물기술유한공사제공.방법:이취유산화O-최갑기각취당위기질재료,채용초성파법제비취유산-O-최갑기각취당납미입자,용저온자력교반법제비재간세포생장인자적취유산-O-최갑기각취당납미입자.용해재약납미입자진행원대인서간세포배양,병이/불가간세포생장인자적보통배양작위대조,채용CCK-8체외세포증식검측시환제합검측배양간세포활력.주요관찰지표:관찰해재약납미입자적결구、립경급표면형모,측정기립경분잡화표면전위,동태감측강해과정중입자표면형모적변화、강해과정중질량적손실정황화강해개질적pH치변화정황.병진일보검측배양1주내간세포적활력.결과:재간세포생장인자적PLA-O-CMC납미입자정구형,기평균립경위140 nm,립경분포지수위0.108,재약솔위0.126 65%,포봉솔위76.32%,입자표면전위위32.8 eV.해재약납미입자전24 h석약동역학방정위Q=148.426 6+189.049 3 t1/2(R=O.975 89),부합Huguchi방정:전30 d내석방동역학방정Q=1 086.289 66+58.239 38t(R=0.997 16),부합령급석방방정.재약납미입자조간세포활력명현고우보통배양조(P＜0.05).결론:실험성공제비병표정료재간세포생장인자적취유산-O-최갑기각취당납미입자,병증실기능구유효유지배양대서간세포적활력.
