CAJ | 학술논문

背景:基因转染可以提高骨髓间充质干细胞在移植区的存活,但目前对肾上腺髓质素基因转染骨髓间充质干细胞在缺氧条件下增殖、凋亡及分泌情况的研究很少.目的:观察肾上腺髓质素基因转染对骨髓间充质干细胞在缺氧及无血清培养条件下增殖、凋亡、分泌血管内皮生长因子的影响.方法:贴壁法体外分离、扩增培养大鼠骨髓间充质干细胞.用x-gal染色测含肾上腺髓质素基因的重组腺病毒Ad-ADM对骨髓间充质干细胞的感染率.骨髓间充质干细胞分为未转染组、空载体组、Ad-ADM转染组.在缺氧、无血清条件下进行骨髓间充质干细胞的培养,在缺氧0,3,6,9,12,16,20,24 h CCK-8法检测细胞增殖情况,ELISA法检测检测细胞上清液肾上腺髓质素及血管内皮生长因子表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果与结论:重组腺病毒对骨髓间充质干细胞的转染率与病毒感染复数具有量效关系,病毒感染复数为150时细胞的感染率达95.4%.缺氧、无血清培养条件下,3组骨髓间充质干细胞均出现生长抑制、凋亡增加,但是肾上腺髓质素基因转染组于0,3,6,9,12,16 h细胞凋亡率显著低于其他两组(P﹤0.05).缺氧 9,12 h,骨髓间充质干细胞分泌肾上腺髓质素及血管内皮生长因子达到高峰,且Ad-ADM转染组显著增高于其他两组(P﹤0.05).提示在缺氧、无血清培养条件下 (<20 h),肾上腺髓质素基因转染可增强骨髓间充质干细胞抗凋亡能力,这可能与肾上腺髓质素、血管内皮生长因子表达增加有关.
배경:기인전염가이제고골수간충질간세포재이식구적존활,단목전대신상선수질소기인전염골수간충질간세포재결양조건하증식、조망급분비정황적연구흔소.목적:관찰신상선수질소기인전염대골수간충질간세포재결양급무혈청배양조건하증식、조망、분비혈관내피생장인자적영향.방법:첩벽법체외분리、확증배양대서골수간충질간세포.용x-gal염색측함신상선수질소기인적중조선병독Ad-ADM대골수간충질간세포적감염솔.골수간충질간세포분위미전염조、공재체조、Ad-ADM전염조.재결양、무혈청조건하진행골수간충질간세포적배양,재결양0,3,6,9,12,16,20,24 h CCK-8법검측세포증식정황,ELISA법검측검측세포상청액신상선수질소급혈관내피생장인자표체,TUNEL법검측세포조망정황.결과여결론:중조선병독대골수간충질간세포적전염솔여병독감염복수구유량효관계,병독감염복수위150시세포적감염솔체95.4%.결양、무혈청배양조건하,3조골수간충질간세포균출현생장억제、조망증가,단시신상선수질소기인전염조우0,3,6,9,12,16 h세포조망솔현저저우기타량조(P﹤0.05).결양 9,12 h,골수간충질간세포분비신상선수질소급혈관내피생장인자체도고봉,차Ad-ADM전염조현저증고우기타량조(P﹤0.05).제시재결양、무혈청배양조건하 (<20 h),신상선수질소기인전염가증강골수간충질간세포항조망능력,저가능여신상선수질소、혈관내피생장인자표체증가유관.