中国心血管杂志
中國心血管雜誌
중국심혈관잡지
CHINESE JOURNAL OF CARDIOVASOLOGY
2010年
5期
388-391
,共4页
梁长清%杨志明%张娜娜%康玉明
樑長清%楊誌明%張娜娜%康玉明
량장청%양지명%장나나%강옥명
血管紧张素Ⅱ%p38丝裂原活化蛋白激酶类%内皮细胞%炎症
血管緊張素Ⅱ%p38絲裂原活化蛋白激酶類%內皮細胞%炎癥
혈관긴장소Ⅱ%p38사렬원활화단백격매류%내피세포%염증
目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)激活人脐静脉内皮细胞(HUVECs)p38丝裂素激活蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路的作用.方法 用含20%胎牛血清的DMEM培养基与CO2培养箱(5%CO2+95%空气)培养HUVECs.待细胞生长至80%融合时,无血清培养16 h后分组:(1)AngⅡ不同时点观察组:用AngⅡ(终浓度100 nmoL/L)分别刺激细胞0.5、10、15、30、45 min和60 min.(2)AngⅡ不同剂量作用组:分别用终浓度为0、10、100、1000 nmol/L和10 000 nmol/L的AngⅡ刺激细胞15 min.(3)AngⅡ+p38MAPK特异性抑制剂SB202190组:在AngⅡ(终浓度100 nmol/L)刺激前30 min,分别将1000 nmol/L和5000 nmol/L(终浓度)的SB202190加入培养基,共同孵育30 min.上述各组作用一定时间后收集细胞,用Western blot方法测定细胞p38MAPK磷酸化表达.结果 AngⅡ(100 nmol/L)可诱导HUVECs p38MAPK磷酸化表达,15～30 min达到高峰,分别升高2.25和2.51倍(P<0.005,n=5),随时间呈峰形变化;AngⅡ呈剂量依赖性诱导HUVECs p38MAPK磷酸化,在AngⅡ100 nmol/L时p38MAPK磷酸化表达即有明显增强,在AngⅡ刺激剂量为1000 nmol/L和10 OOO nmol/L时,p38MAPK磷酸化表达分别增加2.03和2.11倍(P<0.005,n=5);p38MAPK特异性抑制剂SB202190可显著抑制HUVECs p38MAPK磷酸化,且呈剂量依赖性,5000 nmoL/L SB202190的抑制率为53.9%(P<0.01,n=6).结论 Ang Ⅱ可激活人脐静脉内皮细胞p38MAPK信号通路.
目的 探討血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)激活人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)p38絲裂素激活蛋白激酶(p38MAPK)信號轉導通路的作用.方法 用含20%胎牛血清的DMEM培養基與CO2培養箱(5%CO2+95%空氣)培養HUVECs.待細胞生長至80%融閤時,無血清培養16 h後分組:(1)AngⅡ不同時點觀察組:用AngⅡ(終濃度100 nmoL/L)分彆刺激細胞0.5、10、15、30、45 min和60 min.(2)AngⅡ不同劑量作用組:分彆用終濃度為0、10、100、1000 nmol/L和10 000 nmol/L的AngⅡ刺激細胞15 min.(3)AngⅡ+p38MAPK特異性抑製劑SB202190組:在AngⅡ(終濃度100 nmol/L)刺激前30 min,分彆將1000 nmol/L和5000 nmol/L(終濃度)的SB202190加入培養基,共同孵育30 min.上述各組作用一定時間後收集細胞,用Western blot方法測定細胞p38MAPK燐痠化錶達.結果 AngⅡ(100 nmol/L)可誘導HUVECs p38MAPK燐痠化錶達,15～30 min達到高峰,分彆升高2.25和2.51倍(P<0.005,n=5),隨時間呈峰形變化;AngⅡ呈劑量依賴性誘導HUVECs p38MAPK燐痠化,在AngⅡ100 nmol/L時p38MAPK燐痠化錶達即有明顯增彊,在AngⅡ刺激劑量為1000 nmol/L和10 OOO nmol/L時,p38MAPK燐痠化錶達分彆增加2.03和2.11倍(P<0.005,n=5);p38MAPK特異性抑製劑SB202190可顯著抑製HUVECs p38MAPK燐痠化,且呈劑量依賴性,5000 nmoL/L SB202190的抑製率為53.9%(P<0.01,n=6).結論 Ang Ⅱ可激活人臍靜脈內皮細胞p38MAPK信號通路.
목적 탐토혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)격활인제정맥내피세포(HUVECs)p38사렬소격활단백격매(p38MAPK)신호전도통로적작용.방법 용함20%태우혈청적DMEM배양기여CO2배양상(5%CO2+95%공기)배양HUVECs.대세포생장지80%융합시,무혈청배양16 h후분조:(1)AngⅡ불동시점관찰조:용AngⅡ(종농도100 nmoL/L)분별자격세포0.5、10、15、30、45 min화60 min.(2)AngⅡ불동제량작용조:분별용종농도위0、10、100、1000 nmol/L화10 000 nmol/L적AngⅡ자격세포15 min.(3)AngⅡ+p38MAPK특이성억제제SB202190조:재AngⅡ(종농도100 nmol/L)자격전30 min,분별장1000 nmol/L화5000 nmol/L(종농도)적SB202190가입배양기,공동부육30 min.상술각조작용일정시간후수집세포,용Western blot방법측정세포p38MAPK린산화표체.결과 AngⅡ(100 nmol/L)가유도HUVECs p38MAPK린산화표체,15～30 min체도고봉,분별승고2.25화2.51배(P<0.005,n=5),수시간정봉형변화;AngⅡ정제량의뢰성유도HUVECs p38MAPK린산화,재AngⅡ100 nmol/L시p38MAPK린산화표체즉유명현증강,재AngⅡ자격제량위1000 nmol/L화10 OOO nmol/L시,p38MAPK린산화표체분별증가2.03화2.11배(P<0.005,n=5);p38MAPK특이성억제제SB202190가현저억제HUVECs p38MAPK린산화,차정제량의뢰성,5000 nmoL/L SB202190적억제솔위53.9%(P<0.01,n=6).결론 Ang Ⅱ가격활인제정맥내피세포p38MAPK신호통로.
