解剖学研究
解剖學研究
해부학연구
ANATOMY RESEARCH
2011年
3期
202-204
,共3页
刘芙蓉%李晓东%李家滨%李丰
劉芙蓉%李曉東%李傢濱%李豐
류부용%리효동%리가빈%리봉
PAK2%真核表达%免疫印记%免疫荧光%胃癌
PAK2%真覈錶達%免疫印記%免疫熒光%胃癌
PAK2%진핵표체%면역인기%면역형광%위암
目的 构建PAK2真核表达载体及证实在胃癌细胞内的表达与定位.方法 提取HeLa细胞的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增PAK2全长编码基因,克隆至pcDNA3.1A表达载体中.将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞SGC-7901中,Western blot检测蛋白表达,免疫荧光检测PAK2在胃癌细胞内的定位.结果 hPAK2全长基因序列克隆到了真核表达载体pcDNA3.1A中,酶切鉴定片段为2 000 bp.Western blot检测到重组质粒蛋白表达,分子量约为75 kDa.免疫荧光检测pcDNA3.1A-PAK2在胃癌细胞内的定位以细胞浆为主,细胞核内少许.结论 成功构建hPAK2全长基因真核表达载体,重组质粒主要定位于胃癌细胞浆.
目的 構建PAK2真覈錶達載體及證實在胃癌細胞內的錶達與定位.方法 提取HeLa細胞的mRNA,反轉錄為cDNA.PCR擴增PAK2全長編碼基因,剋隆至pcDNA3.1A錶達載體中.將構建的重組質粒測序併轉染到胃癌細胞SGC-7901中,Western blot檢測蛋白錶達,免疫熒光檢測PAK2在胃癌細胞內的定位.結果 hPAK2全長基因序列剋隆到瞭真覈錶達載體pcDNA3.1A中,酶切鑒定片段為2 000 bp.Western blot檢測到重組質粒蛋白錶達,分子量約為75 kDa.免疫熒光檢測pcDNA3.1A-PAK2在胃癌細胞內的定位以細胞漿為主,細胞覈內少許.結論 成功構建hPAK2全長基因真覈錶達載體,重組質粒主要定位于胃癌細胞漿.
목적 구건PAK2진핵표체재체급증실재위암세포내적표체여정위.방법 제취HeLa세포적mRNA,반전록위cDNA.PCR확증PAK2전장편마기인,극륭지pcDNA3.1A표체재체중.장구건적중조질립측서병전염도위암세포SGC-7901중,Western blot검측단백표체,면역형광검측PAK2재위암세포내적정위.결과 hPAK2전장기인서렬극륭도료진핵표체재체pcDNA3.1A중,매절감정편단위2 000 bp.Western blot검측도중조질립단백표체,분자량약위75 kDa.면역형광검측pcDNA3.1A-PAK2재위암세포내적정위이세포장위주,세포핵내소허.결론 성공구건hPAK2전장기인진핵표체재체,중조질립주요정위우위암세포장.
