天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2012年
1期
46-49
,共4页
孙宁%陈剑秋%孙晋津%李辰运%张晓宇%邢帅
孫寧%陳劍鞦%孫晉津%李辰運%張曉宇%邢帥
손저%진검추%손진진%리신운%장효우%형수
内皮细胞%肝细胞生长因子%脂质体%腺病毒科%遗传载体%大鼠,Wistar%内皮祖细胞
內皮細胞%肝細胞生長因子%脂質體%腺病毒科%遺傳載體%大鼠,Wistar%內皮祖細胞
내피세포%간세포생장인자%지질체%선병독과%유전재체%대서,Wistar%내피조세포
目的:比较脂质体和腺病毒作为肝细胞生长因子(HGF)基因转染内皮祖细胞载体的效力.方法:分离培养大鼠骨髓血管内皮祖细胞,并通过摄取DiL-acLDL、结合FITC-UEA-1及流式细胞术检测表面抗原CD133+进行鉴定.脂质体介导细胞转染,将细胞分为HGF质粒转染组(转染pIRES2-EGFP-HGF质粒)、空载质粒转染组(转染plRES2-EGFP质粒)和空白对照组.病毒介导细胞转染,细胞分HGF病毒转染组(pAdxsi-GFP-HGF重组腺病毒转染)、空载病毒转染组(导入pAdxsi-GFP腺病毒)和空白对照组.荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,ELISA法检测HGF的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖能力.结果:脂质体和腺病毒载体均可成功将绿色荧光蛋白标记的HGF基因转入内皮祖细胞,其中腺病毒转染效率更高,最高可达80％以上,其表达HGF水平以及细胞增殖能力都明显强于脂质体转染.空载病毒转染组细胞增殖与空白对照组差异无统计学意义(P＞0.05),而空载质粒转染组细胞增殖明显少于空白对照组(P＜0.05).结论:腺病毒作为HGF基因转染内皮祖细胞的载体相对于脂质体载体具有更高效、低毒、高表达目的基因的优点.
目的:比較脂質體和腺病毒作為肝細胞生長因子(HGF)基因轉染內皮祖細胞載體的效力.方法:分離培養大鼠骨髓血管內皮祖細胞,併通過攝取DiL-acLDL、結閤FITC-UEA-1及流式細胞術檢測錶麵抗原CD133+進行鑒定.脂質體介導細胞轉染,將細胞分為HGF質粒轉染組(轉染pIRES2-EGFP-HGF質粒)、空載質粒轉染組(轉染plRES2-EGFP質粒)和空白對照組.病毒介導細胞轉染,細胞分HGF病毒轉染組(pAdxsi-GFP-HGF重組腺病毒轉染)、空載病毒轉染組(導入pAdxsi-GFP腺病毒)和空白對照組.熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的錶達,ELISA法檢測HGF的錶達,四甲基偶氮唑鹽(MTT)檢測細胞增殖能力.結果:脂質體和腺病毒載體均可成功將綠色熒光蛋白標記的HGF基因轉入內皮祖細胞,其中腺病毒轉染效率更高,最高可達80％以上,其錶達HGF水平以及細胞增殖能力都明顯彊于脂質體轉染.空載病毒轉染組細胞增殖與空白對照組差異無統計學意義(P＞0.05),而空載質粒轉染組細胞增殖明顯少于空白對照組(P＜0.05).結論:腺病毒作為HGF基因轉染內皮祖細胞的載體相對于脂質體載體具有更高效、低毒、高錶達目的基因的優點.
목적:비교지질체화선병독작위간세포생장인자(HGF)기인전염내피조세포재체적효력.방법:분리배양대서골수혈관내피조세포,병통과섭취DiL-acLDL、결합FITC-UEA-1급류식세포술검측표면항원CD133+진행감정.지질체개도세포전염,장세포분위HGF질립전염조(전염pIRES2-EGFP-HGF질립)、공재질립전염조(전염plRES2-EGFP질립)화공백대조조.병독개도세포전염,세포분HGF병독전염조(pAdxsi-GFP-HGF중조선병독전염)、공재병독전염조(도입pAdxsi-GFP선병독)화공백대조조.형광현미경관찰록색형광단백적표체,ELISA법검측HGF적표체,사갑기우담서염(MTT)검측세포증식능력.결과:지질체화선병독재체균가성공장록색형광단백표기적HGF기인전입내피조세포,기중선병독전염효솔경고,최고가체80％이상,기표체HGF수평이급세포증식능력도명현강우지질체전염.공재병독전염조세포증식여공백대조조차이무통계학의의(P＞0.05),이공재질립전염조세포증식명현소우공백대조조(P＜0.05).결론:선병독작위HGF기인전염내피조세포적재체상대우지질체재체구유경고효、저독、고표체목적기인적우점.
