中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2012年
2期
178-182
,共5页
易俊波%王晓红%买制刚%章刚%李凌云%林枫
易俊波%王曉紅%買製剛%章剛%李凌雲%林楓
역준파%왕효홍%매제강%장강%리릉운%림풍
刚地弓形虫%P35表面抗原%基因表达%免疫印迹
剛地弓形蟲%P35錶麵抗原%基因錶達%免疫印跡
강지궁형충%P35표면항원%기인표체%면역인적
目的 制备具有免疫活性的弓形虫表面抗原P35基因片段的重组蛋白,并对其抗原性进行分析.方法 根据弓形虫RH株表面抗原P35的cDNA序列设计一对引物,利用PCR技术从RH株弓形虫基因组中扩增出P35的基因片段,将其克隆到T载体中,并通过基因测序加以证实;将其亚克隆至原核表达载体pET-KDO中,在大肠杆菌中经IPrG诱导表达.采用免疫印迹法对表达产物进行抗原性分析.结果 从弓形虫RH株基因组中成功扩增到P35目的基因,该基因在原核系统中经诱导表达出分子量约42 000 Da大小的融合蛋白,经免疫印迹实验表明,表达产物具有良好的抗原性,经亲和层析纯化后得到了重组蛋白.结论 运用基因工程技术得到了高纯度并具有良好抗原性的弓形虫重组P35融合蛋白.
目的 製備具有免疫活性的弓形蟲錶麵抗原P35基因片段的重組蛋白,併對其抗原性進行分析.方法 根據弓形蟲RH株錶麵抗原P35的cDNA序列設計一對引物,利用PCR技術從RH株弓形蟲基因組中擴增齣P35的基因片段,將其剋隆到T載體中,併通過基因測序加以證實;將其亞剋隆至原覈錶達載體pET-KDO中,在大腸桿菌中經IPrG誘導錶達.採用免疫印跡法對錶達產物進行抗原性分析.結果 從弓形蟲RH株基因組中成功擴增到P35目的基因,該基因在原覈繫統中經誘導錶達齣分子量約42 000 Da大小的融閤蛋白,經免疫印跡實驗錶明,錶達產物具有良好的抗原性,經親和層析純化後得到瞭重組蛋白.結論 運用基因工程技術得到瞭高純度併具有良好抗原性的弓形蟲重組P35融閤蛋白.
목적 제비구유면역활성적궁형충표면항원P35기인편단적중조단백,병대기항원성진행분석.방법 근거궁형충RH주표면항원P35적cDNA서렬설계일대인물,이용PCR기술종RH주궁형충기인조중확증출P35적기인편단,장기극륭도T재체중,병통과기인측서가이증실;장기아극륭지원핵표체재체pET-KDO중,재대장간균중경IPrG유도표체.채용면역인적법대표체산물진행항원성분석.결과 종궁형충RH주기인조중성공확증도P35목적기인,해기인재원핵계통중경유도표체출분자량약42 000 Da대소적융합단백,경면역인적실험표명,표체산물구유량호적항원성,경친화층석순화후득도료중조단백.결론 운용기인공정기술득도료고순도병구유량호항원성적궁형충중조P35융합단백.
