中国矫形外科杂志
中國矯形外科雜誌
중국교형외과잡지
THE ORTHOPEDIC JOURNAL OF CHINA
2007年
6期
463-466
,共4页
施洪臣%吕仁发%周强%许建中
施洪臣%呂仁髮%週彊%許建中
시홍신%려인발%주강%허건중
皮质骨Ⅰ型胶原%增强酶解法%碱溶法
皮質骨Ⅰ型膠原%增彊酶解法%堿溶法
피질골Ⅰ형효원%증강매해법%감용법
[目的]通过对两种方法提取的骨胶原产量及特性的比较,推荐-种较为理想的提取皮质骨Ⅰ型胶原的方法.[方法]以猪皮质骨为原料,去除软组织后劈成小骨块,经酒精梯度脱水、无水乙醚脱脂、盐酸脱钙、甲醇:氯仿(1:1,v/v)再脱脂处理后,骨块软化.然后将软化的骨块在高速粉碎机上粉碎成脱钙骨基质粉.分别采用传统的碱溶法和自建的增强酶解法对脱钙骨基质粉处理,经溶解、离心、透析、冻干等操作提取皮质骨胶原.最后对增强酶解法所得产物进行鉴定,并对两种提取方法的效率及得到的产物的外观、黏度、凝胶固化性进行比较.[结果]增强酶解法所得胶原的氨基酸组成、蛋白电泳、相对分子量大小、最大光吸收波长均符合Ⅰ型胶原特征;和碱溶法比较,提取率由(57.8±4.96)%提高到(94.04±0.55)%;其相同浓度(0.03%,w/v)醋酸溶液黏度测定,增强酶解法为3.71,碱提法为2.81;在37.0℃,pH值7.35~7.45条件下行凝胶固化性检测,增强酶解法所提胶原凝胶液约10 min可固化形成凝胶块,而碱提法所提胶原的溶液仍为黏性液体.[结论]增强酶解法提取的骨胶原是Ⅰ型胶原;相对于碱提法,该法提取效率高,所得胶原纯度高、黏性好、固化性好,是一种较好的从猪皮质骨中制备Ⅰ型胶原的方法.
[目的]通過對兩種方法提取的骨膠原產量及特性的比較,推薦-種較為理想的提取皮質骨Ⅰ型膠原的方法.[方法]以豬皮質骨為原料,去除軟組織後劈成小骨塊,經酒精梯度脫水、無水乙醚脫脂、鹽痠脫鈣、甲醇:氯倣(1:1,v/v)再脫脂處理後,骨塊軟化.然後將軟化的骨塊在高速粉碎機上粉碎成脫鈣骨基質粉.分彆採用傳統的堿溶法和自建的增彊酶解法對脫鈣骨基質粉處理,經溶解、離心、透析、凍榦等操作提取皮質骨膠原.最後對增彊酶解法所得產物進行鑒定,併對兩種提取方法的效率及得到的產物的外觀、黏度、凝膠固化性進行比較.[結果]增彊酶解法所得膠原的氨基痠組成、蛋白電泳、相對分子量大小、最大光吸收波長均符閤Ⅰ型膠原特徵;和堿溶法比較,提取率由(57.8±4.96)%提高到(94.04±0.55)%;其相同濃度(0.03%,w/v)醋痠溶液黏度測定,增彊酶解法為3.71,堿提法為2.81;在37.0℃,pH值7.35~7.45條件下行凝膠固化性檢測,增彊酶解法所提膠原凝膠液約10 min可固化形成凝膠塊,而堿提法所提膠原的溶液仍為黏性液體.[結論]增彊酶解法提取的骨膠原是Ⅰ型膠原;相對于堿提法,該法提取效率高,所得膠原純度高、黏性好、固化性好,是一種較好的從豬皮質骨中製備Ⅰ型膠原的方法.
[목적]통과대량충방법제취적골효원산량급특성적비교,추천-충교위이상적제취피질골Ⅰ형효원적방법.[방법]이저피질골위원료,거제연조직후벽성소골괴,경주정제도탈수、무수을미탈지、염산탈개、갑순:록방(1:1,v/v)재탈지처리후,골괴연화.연후장연화적골괴재고속분쇄궤상분쇄성탈개골기질분.분별채용전통적감용법화자건적증강매해법대탈개골기질분처리,경용해、리심、투석、동간등조작제취피질골효원.최후대증강매해법소득산물진행감정,병대량충제취방법적효솔급득도적산물적외관、점도、응효고화성진행비교.[결과]증강매해법소득효원적안기산조성、단백전영、상대분자량대소、최대광흡수파장균부합Ⅰ형효원특정;화감용법비교,제취솔유(57.8±4.96)%제고도(94.04±0.55)%;기상동농도(0.03%,w/v)작산용액점도측정,증강매해법위3.71,감제법위2.81;재37.0℃,pH치7.35~7.45조건하행응효고화성검측,증강매해법소제효원응효액약10 min가고화형성응효괴,이감제법소제효원적용액잉위점성액체.[결론]증강매해법제취적골효원시Ⅰ형효원;상대우감제법,해법제취효솔고,소득효원순도고、점성호、고화성호,시일충교호적종저피질골중제비Ⅰ형효원적방법.