CAJ | 학술논문

目的:对早孕绒毛的滋养细胞进行原代培养,利用HBV感染血清对滋养细胞进行体外感染,探讨细胞在体外培养条件下对HBV的感染率及HBV在细胞中的复制状态.方法:利用胰蛋白酶和胶原酶联合消化培养法原代培养早孕胎盘中的滋养细胞,并进行免疫组化鉴定,获得纯度较高的滋养细胞后进行体外的HBV感染,通过细胞免疫化学染色、ELISA及PCR法分别检测细胞上清中的HBsAg,细胞中的HBV DNA及cccDNA.结果:原代培养的滋养细胞,细胞生长良好,特异性角蛋白-7 阳性,纯度高.原代滋养细胞在与HBV阳性血清共同孵育后均未出现明显的细胞病变,感染后24h和48h在滋养层细胞细胞浆中可见HBsAg的阳性表达,被感染细胞呈散在分布.感染后48h起可检测到弱阳性的HBsAg及HBVDNA,感染后细胞内未检测出cccDNA.结论:利用联合酶消化法建立了胎盘中滋养细胞的体外培养系统.HBV能够在体外感染原代培养的滋养细胞,对被感染细胞的生长无明显影响.HBV可能不在滋养细胞中复制.
목적:대조잉융모적자양세포진행원대배양,이용HBV감염혈청대자양세포진행체외감염,탐토세포재체외배양조건하대HBV적감염솔급HBV재세포중적복제상태.방법:이용이단백매화효원매연합소화배양법원대배양조잉태반중적자양세포,병진행면역조화감정,획득순도교고적자양세포후진행체외적HBV감염,통과세포면역화학염색、ELISA급PCR법분별검측세포상청중적HBsAg,세포중적HBV DNA급cccDNA.결과:원대배양적자양세포,세포생장량호,특이성각단백-7 양성,순도고.원대자양세포재여HBV양성혈청공동부육후균미출현명현적세포병변,감염후24h화48h재자양층세포세포장중가견HBsAg적양성표체,피감염세포정산재분포.감염후48h기가검측도약양성적HBsAg급HBVDNA,감염후세포내미검측출cccDNA.결론:이용연합매소화법건립료태반중자양세포적체외배양계통.HBV능구재체외감염원대배양적자양세포,대피감염세포적생장무명현영향.HBV가능불재자양세포중복제.