安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
14期
6319-6321
,共3页
张云显%刘发央%杨慧%赵丽%李鹏%李霞
張雲顯%劉髮央%楊慧%趙麗%李鵬%李霞
장운현%류발앙%양혜%조려%리붕%리하
镉%双功能螯合剂%抗原%合成%鉴定
鎘%雙功能螯閤劑%抗原%閤成%鑒定
력%쌍공능오합제%항원%합성%감정
[目的]合成并鉴定重金属镉螯舍物抗原.[方法]以乙二胺四乙酸(EDTA)或二乙烯三胺五乙酸(DTPA)为双功能螯合剂,合成了半抗原,并将半抗原与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)或卵清蛋白(OVA)偶联制备完全抗原,对其进行浓度测定、紫外分光光度计扫描、SDS-PAGE电泳定性鉴定和石墨炉原子吸收光谱法检测.[结果]利用二喹啉甲酸(BCA)法检测分离纯化后的的Cd.DTPA-OVA、Cd-EDTA-KLH、DTPA-OVA和EDTA-KLH中蛋白的实际浓度依次为1.862±0.038、5.121±0.024、25.155±0.014和8.459±0.018mg/ml,紫外扫描和电泳鉴定证明,抗原合成成功;用吸收光谱法检测的上述抗原中的镉离子含量依次为34.6±0.3、96.5±0.5、0和0μg/ml,表明半抗原确实偶联到蛋白质上,进一步证明抗原合成成功.[结论]该研究为重金属螯合物单克隆抗体的制备和建立快速检测方法奠定基础.
[目的]閤成併鑒定重金屬鎘螯捨物抗原.[方法]以乙二胺四乙痠(EDTA)或二乙烯三胺五乙痠(DTPA)為雙功能螯閤劑,閤成瞭半抗原,併將半抗原與載體蛋白鑰孔慼血藍素(KLH)或卵清蛋白(OVA)偶聯製備完全抗原,對其進行濃度測定、紫外分光光度計掃描、SDS-PAGE電泳定性鑒定和石墨爐原子吸收光譜法檢測.[結果]利用二喹啉甲痠(BCA)法檢測分離純化後的的Cd.DTPA-OVA、Cd-EDTA-KLH、DTPA-OVA和EDTA-KLH中蛋白的實際濃度依次為1.862±0.038、5.121±0.024、25.155±0.014和8.459±0.018mg/ml,紫外掃描和電泳鑒定證明,抗原閤成成功;用吸收光譜法檢測的上述抗原中的鎘離子含量依次為34.6±0.3、96.5±0.5、0和0μg/ml,錶明半抗原確實偶聯到蛋白質上,進一步證明抗原閤成成功.[結論]該研究為重金屬螯閤物單剋隆抗體的製備和建立快速檢測方法奠定基礎.
[목적]합성병감정중금속력오사물항원.[방법]이을이알사을산(EDTA)혹이을희삼알오을산(DTPA)위쌍공능오합제,합성료반항원,병장반항원여재체단백약공척혈람소(KLH)혹란청단백(OVA)우련제비완전항원,대기진행농도측정、자외분광광도계소묘、SDS-PAGE전영정성감정화석묵로원자흡수광보법검측.[결과]이용이규람갑산(BCA)법검측분리순화후적적Cd.DTPA-OVA、Cd-EDTA-KLH、DTPA-OVA화EDTA-KLH중단백적실제농도의차위1.862±0.038、5.121±0.024、25.155±0.014화8.459±0.018mg/ml,자외소묘화전영감정증명,항원합성성공;용흡수광보법검측적상술항원중적력리자함량의차위34.6±0.3、96.5±0.5、0화0μg/ml,표명반항원학실우련도단백질상,진일보증명항원합성성공.[결론]해연구위중금속오합물단극륭항체적제비화건립쾌속검측방법전정기출.