首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2010年
1期
88-92
,共5页
姜鸾%邵蕾%胡旸%董凌月
薑鸞%邵蕾%鬍旸%董凌月
강란%소뢰%호양%동릉월
定点突变%PCR%DMSO%人肝刺激因子
定點突變%PCR%DMSO%人肝刺激因子
정점돌변%PCR%DMSO%인간자격인자
目的 利用StrataGene公司的QuickChangeTM定点突变试剂盒对高GC含量的人肝刺激因子启动子进行多位点定点突变.方法 采用含有多位点突变的引物扩增启动子片段,通过加入不同浓度的DMSO, 降低高GC含量模板及引物的解链温度,利用乙醇沉淀提高酶切产物的浓度.结果 经测序鉴定成功构建5个含有不同突变位点的hHSS启动子突变载体.结论 这种改良的PCR方法提高了对高GC含量启动子进行扩增的效率,具有快速、简便、经济、成功率高的特点,是值得推广的多位点定点突变载体构建方法.
目的 利用StrataGene公司的QuickChangeTM定點突變試劑盒對高GC含量的人肝刺激因子啟動子進行多位點定點突變.方法 採用含有多位點突變的引物擴增啟動子片段,通過加入不同濃度的DMSO, 降低高GC含量模闆及引物的解鏈溫度,利用乙醇沉澱提高酶切產物的濃度.結果 經測序鑒定成功構建5箇含有不同突變位點的hHSS啟動子突變載體.結論 這種改良的PCR方法提高瞭對高GC含量啟動子進行擴增的效率,具有快速、簡便、經濟、成功率高的特點,是值得推廣的多位點定點突變載體構建方法.
목적 이용StrataGene공사적QuickChangeTM정점돌변시제합대고GC함량적인간자격인자계동자진행다위점정점돌변.방법 채용함유다위점돌변적인물확증계동자편단,통과가입불동농도적DMSO, 강저고GC함량모판급인물적해련온도,이용을순침정제고매절산물적농도.결과 경측서감정성공구건5개함유불동돌변위점적hHSS계동자돌변재체.결론 저충개량적PCR방법제고료대고GC함량계동자진행확증적효솔,구유쾌속、간편、경제、성공솔고적특점,시치득추엄적다위점정점돌변재체구건방법.
