CAJ | 학술논문

目的:探讨将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子(Cp)下游后对该启动子在不同细胞系中转录活性的影响.方法:利用PCR从质粒pTL-8中扩增7个Teto序列,并将其克隆入T载体pMD19-T/Simple中,测序正确后将7个Teto序列亚克隆入pGL3-Basic/Cp萤光素酶报告基因质粒中Cp启动子的下游,以构建质粒pGL3-Basic/Cp/x7t.将能表达TetR的质粒pTL-8的萤光素酶编码基因切除后,与pGL3-Basic/Cp/x7t共转染肝癌细胞系HepG2、宫颈癌细胞系HeLa、绿猴肾细胞系COS-7、乳腺癌细胞系MDA-MB-231和结肠癌细胞系HT-29,通过双萤光素酶检测系统检测萤光素酶在这些不同细胞系中的活性,以分析将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子下游后对Cp在不同细胞系中转录活性的影响.结果:构建了质粒pGL3-Basic/Cp/x7t,将其转染HeLa、COS-7、HepG2、MDA-MB-231和HT-29细胞后其相对萤光素酶活性分别为56.14、171.52、211.03、6.11和34.24.结论:将Teto序列克隆入Cp下游并不能明显提高Cp的转录活性,而且破坏了Cp的组织特异性转录活性.
목적:탐토장Teto서렬극륭입을형간염병독핵심계동자(Cp)하유후대해계동자재불동세포계중전록활성적영향.방법:이용PCR종질립pTL-8중확증7개Teto서렬,병장기극륭입T재체pMD19-T/Simple중,측서정학후장7개Teto서렬아극륭입pGL3-Basic/Cp형광소매보고기인질립중Cp계동자적하유,이구건질립pGL3-Basic/Cp/x7t.장능표체TetR적질립pTL-8적형광소매편마기인절제후,여pGL3-Basic/Cp/x7t공전염간암세포계HepG2、궁경암세포계HeLa、록후신세포계COS-7、유선암세포계MDA-MB-231화결장암세포계HT-29,통과쌍형광소매검측계통검측형광소매재저사불동세포계중적활성,이분석장Teto서렬극륭입을형간염병독핵심계동자하유후대Cp재불동세포계중전록활성적영향.결과:구건료질립pGL3-Basic/Cp/x7t,장기전염HeLa、COS-7、HepG2、MDA-MB-231화HT-29세포후기상대형광소매활성분별위56.14、171.52、211.03、6.11화34.24.결론:장Teto서렬극륭입Cp하유병불능명현제고Cp적전록활성,이차파배료Cp적조직특이성전록활성.