中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
40期
7415-7419
,共5页
刘永浩%郭亮%何觅春%沈振亚
劉永浩%郭亮%何覓春%瀋振亞
류영호%곽량%하멱춘%침진아
超顺磁性氧化铁颗粒%骨髓间充质干细胞%5-氮胞苷%诱导分化%心肌样细胞
超順磁性氧化鐵顆粒%骨髓間充質榦細胞%5-氮胞苷%誘導分化%心肌樣細胞
초순자성양화철과립%골수간충질간세포%5-담포감%유도분화%심기양세포
背景: 骨髓间充质干细胞体外经多种诱导剂均可成功转化为心肌样细胞,目前国内外报道中普遍采用的诱导剂为5-氮胞苷.超顺磁性氧化铁颗粒直径小,可被干细胞吞噬,加上其顺磁性可被MRI探测到信号,因而成为目前广泛应用于活体检测干细胞移植的理想示踪剂.目的: 与未经标记的干细胞相比,观察超顺磁性氧化铁颗粒标记方式对干细胞体外经5-氮胞苷诱导向心肌样细胞分化效应的影响.方法: 分离培养猪骨髓间充质干细胞,实验组采用P3代细胞经超顺磁性氧化铁颗粒标记,标记后细胞经5-氮胞苷体外诱导24 h后继续培养,对照组直接经5-氮胞苷诱导.2周后用抗结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白I、连接蛋白43进行免疫细胞化学染色鉴定,经普鲁士蓝染色观察细胞内铁颗粒.结果与结论: 5-氮胞苷诱导分化后细胞表达抗结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白I和连接蛋白43,且超顺磁性氧化铁颗粒标记诱导细胞内普鲁士蓝染色呈阳性.提示超顺磁性氧化铁颗粒标记骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷体外诱导后可以分化为心肌样细胞.
揹景: 骨髓間充質榦細胞體外經多種誘導劑均可成功轉化為心肌樣細胞,目前國內外報道中普遍採用的誘導劑為5-氮胞苷.超順磁性氧化鐵顆粒直徑小,可被榦細胞吞噬,加上其順磁性可被MRI探測到信號,因而成為目前廣汎應用于活體檢測榦細胞移植的理想示蹤劑.目的: 與未經標記的榦細胞相比,觀察超順磁性氧化鐵顆粒標記方式對榦細胞體外經5-氮胞苷誘導嚮心肌樣細胞分化效應的影響.方法: 分離培養豬骨髓間充質榦細胞,實驗組採用P3代細胞經超順磁性氧化鐵顆粒標記,標記後細胞經5-氮胞苷體外誘導24 h後繼續培養,對照組直接經5-氮胞苷誘導.2週後用抗結蛋白、肌毬蛋白重鏈、心肌特異性肌鈣蛋白I、連接蛋白43進行免疫細胞化學染色鑒定,經普魯士藍染色觀察細胞內鐵顆粒.結果與結論: 5-氮胞苷誘導分化後細胞錶達抗結蛋白、肌毬蛋白重鏈、心肌特異性肌鈣蛋白I和連接蛋白43,且超順磁性氧化鐵顆粒標記誘導細胞內普魯士藍染色呈暘性.提示超順磁性氧化鐵顆粒標記骨髓間充質榦細胞經5-氮胞苷體外誘導後可以分化為心肌樣細胞.
배경: 골수간충질간세포체외경다충유도제균가성공전화위심기양세포,목전국내외보도중보편채용적유도제위5-담포감.초순자성양화철과립직경소,가피간세포탄서,가상기순자성가피MRI탐측도신호,인이성위목전엄범응용우활체검측간세포이식적이상시종제.목적: 여미경표기적간세포상비,관찰초순자성양화철과립표기방식대간세포체외경5-담포감유도향심기양세포분화효응적영향.방법: 분리배양저골수간충질간세포,실험조채용P3대세포경초순자성양화철과립표기,표기후세포경5-담포감체외유도24 h후계속배양,대조조직접경5-담포감유도.2주후용항결단백、기구단백중련、심기특이성기개단백I、련접단백43진행면역세포화학염색감정,경보로사람염색관찰세포내철과립.결과여결론: 5-담포감유도분화후세포표체항결단백、기구단백중련、심기특이성기개단백I화련접단백43,차초순자성양화철과립표기유도세포내보로사람염색정양성.제시초순자성양화철과립표기골수간충질간세포경5-담포감체외유도후가이분화위심기양세포.
