CAJ | 학술논문

本研究探讨YB-1基因表达下调后时白血病细胞K562/A02生物学行为的影响及其机制.采用脂质体介导的方法将已构建的人YB-1基因特异性shRNA及随机片段HK的真核表达载体转染进白血病细胞K562/A02中,RT-PCR和免疫印迹反应检测YB-1 mRNA和蛋白表达量的改变;采用MTT法和细胞周期测定分析对白血病细胞增殖的影响;用Annexin V检测白血病细胞的凋亡程度;采用MTT法检测细胞IC(50)值变化;RT-PCR和流式细胞术检测基因转染前后细胞中的MDR1 mRNA和P-gp表达的变化.结果表明,阳性转染的3组细胞YB-1墓因和蛋白的表达量明显低于随机片段组和未转染细胞;生长曲线提示阳性转染组细胞生长缓慢,细胞周期动力学分析显示阳性转染组G1期细胞增多,G2期与S期细胞显著减少;在小剂量As2O3作用下,阳性转染组细胞的凋亡数量明显高于对照组细胞;阳性转染细胞的阿霉素IC(50)明显低于随机片段组和阴性对照组;阳性转染细胞MDR1 mRNA水平明显降低,P-gp的峰值较对照组明显左移.结论:YB-1特异性shRNA能有效降低白血病细胞中YB-1的表达,减慢细胞生长,增加白血病细胞对化疗药物的敏感性,加速细胞凋亡.
본연구탐토YB-1기인표체하조후시백혈병세포K562/A02생물학행위적영향급기궤제.채용지질체개도적방법장이구건적인YB-1기인특이성shRNA급수궤편단HK적진핵표체재체전염진백혈병세포K562/A02중,RT-PCR화면역인적반응검측YB-1 mRNA화단백표체량적개변;채용MTT법화세포주기측정분석대백혈병세포증식적영향;용Annexin V검측백혈병세포적조망정도;채용MTT법검측세포IC(50)치변화;RT-PCR화류식세포술검측기인전염전후세포중적MDR1 mRNA화P-gp표체적변화.결과표명,양성전염적3조세포YB-1묘인화단백적표체량명현저우수궤편단조화미전염세포;생장곡선제시양성전염조세포생장완만,세포주기동역학분석현시양성전염조G1기세포증다,G2기여S기세포현저감소;재소제량As2O3작용하,양성전염조세포적조망수량명현고우대조조세포;양성전염세포적아매소IC(50)명현저우수궤편단조화음성대조조;양성전염세포MDR1 mRNA수평명현강저,P-gp적봉치교대조조명현좌이.결론:YB-1특이성shRNA능유효강저백혈병세포중YB-1적표체,감만세포생장,증가백혈병세포대화료약물적민감성,가속세포조망.