遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2011年
10期
1134-1140
,共7页
李姗姗%雍静茹%齐云玲%章颖%赵亮%夏士林%李东%王慧利%包其郁%李佩珍
李姍姍%雍靜茹%齊雲玲%章穎%趙亮%夏士林%李東%王慧利%包其鬱%李珮珍
리산산%옹정여%제운령%장영%조량%하사림%리동%왕혜리%포기욱%리패진
绿色荧光蛋白%螺旋藻%启动子%集胞藻%耐盐相关基因
綠色熒光蛋白%螺鏇藻%啟動子%集胞藻%耐鹽相關基因
록색형광단백%라선조%계동자%집포조%내염상관기인
文章利用绿色荧光蛋白基因作为报告基因,研究2个螺旋藻耐盐相关基因启动子区域的功能.通过启动子预测软件预测螺旋藻耐盐相关基因5’端非翻译区的启动子结构,用Primer3.0程序在线设计引物,以pMD18-T载体和pUC18载体克隆螺旋藻启动子序列、gfb和卡那霉素抗性基因,将螺旋藻启动子-GFP基因-卡那霉素抗性基因(pro-gfp-kanr)三联DNA片段克隆至pKW1188载体,并将该重组质粒pKWl 188::pro::gfp::kanr 转化至受体菌集胞藻6803,激光共聚焦显微镜观察不同盐浓度培养条件下、不同时间段集胞藻表达GFP的情况.结果显示,通过不同盐浓度和不同时间的诱导,2个螺旋藻启动子在0.4～0.6 mol/L NaC1条件下,培养6～8 h表达的绿色荧光蛋白最多.文章成功构建了以绿色荧光蛋白为报告基因、卡那霉素抗性基因为选择标记、集胞藻6803作为外源基因表达受体,进行螺旋藻耐盐相关基因功能研究的平台;另外,从螺旋藻启动子能被盐诱导大量表达GFP的结果看,与启动子相关的螺旋藻基因很可能与螺旋藻的耐盐性相关.
文章利用綠色熒光蛋白基因作為報告基因,研究2箇螺鏇藻耐鹽相關基因啟動子區域的功能.通過啟動子預測軟件預測螺鏇藻耐鹽相關基因5’耑非翻譯區的啟動子結構,用Primer3.0程序在線設計引物,以pMD18-T載體和pUC18載體剋隆螺鏇藻啟動子序列、gfb和卡那黴素抗性基因,將螺鏇藻啟動子-GFP基因-卡那黴素抗性基因(pro-gfp-kanr)三聯DNA片段剋隆至pKW1188載體,併將該重組質粒pKWl 188::pro::gfp::kanr 轉化至受體菌集胞藻6803,激光共聚焦顯微鏡觀察不同鹽濃度培養條件下、不同時間段集胞藻錶達GFP的情況.結果顯示,通過不同鹽濃度和不同時間的誘導,2箇螺鏇藻啟動子在0.4～0.6 mol/L NaC1條件下,培養6～8 h錶達的綠色熒光蛋白最多.文章成功構建瞭以綠色熒光蛋白為報告基因、卡那黴素抗性基因為選擇標記、集胞藻6803作為外源基因錶達受體,進行螺鏇藻耐鹽相關基因功能研究的平檯;另外,從螺鏇藻啟動子能被鹽誘導大量錶達GFP的結果看,與啟動子相關的螺鏇藻基因很可能與螺鏇藻的耐鹽性相關.
문장이용록색형광단백기인작위보고기인,연구2개라선조내염상관기인계동자구역적공능.통과계동자예측연건예측라선조내염상관기인5’단비번역구적계동자결구,용Primer3.0정서재선설계인물,이pMD18-T재체화pUC18재체극륭라선조계동자서렬、gfb화잡나매소항성기인,장라선조계동자-GFP기인-잡나매소항성기인(pro-gfp-kanr)삼련DNA편단극륭지pKW1188재체,병장해중조질립pKWl 188::pro::gfp::kanr 전화지수체균집포조6803,격광공취초현미경관찰불동염농도배양조건하、불동시간단집포조표체GFP적정황.결과현시,통과불동염농도화불동시간적유도,2개라선조계동자재0.4～0.6 mol/L NaC1조건하,배양6～8 h표체적록색형광단백최다.문장성공구건료이록색형광단백위보고기인、잡나매소항성기인위선택표기、집포조6803작위외원기인표체수체,진행라선조내염상관기인공능연구적평태;령외,종라선조계동자능피염유도대량표체GFP적결과간,여계동자상관적라선조기인흔가능여라선조적내염성상관.
