化学与生物工程
化學與生物工程
화학여생물공정
CHEMISTRY & BIOENGINEERING
2012年
4期
27-31
,共5页
马晓娟%蔚萍%妙亮%边六交
馬曉娟%蔚萍%妙亮%邊六交
마효연%위평%묘량%변륙교
血管生长抑制因子Kringle 5%发酵培养基%诱导表达%基因工程菌%优化
血管生長抑製因子Kringle 5%髮酵培養基%誘導錶達%基因工程菌%優化
혈관생장억제인자Kringle 5%발효배양기%유도표체%기인공정균%우화
在实验室试管培养条件下优化了基因工程菌E.coli BL21(DE3) pET15b/K5发酵产可溶型非融合血管生长抑制因子Kringle 5的培养基和诱导表达条件.经菌体干重测定和SDS-PAGE检测,确定最佳培养基(g·L-1)为:胰蛋白胨10.0,酵母提取物5.0,NaCl 10.0,葡萄糖6.0,NH4Cl 2.6,NaH2PO45.0,Na2 HPO4 6.0；优化的诱导表达条件为:诱导剂浓度0.01 mmol· L-1,诱导时间6h,诱导温度37℃,摇床转速220 r· min-1.在优化的培养基和诱导表达条件下,菌体干重为1.8g·L-1,Kringle 5表达量为360 mg·L-1,占总蛋白含量的20％,与基础LB培养基相比,Kringle 5表达量提高了1.18倍.
在實驗室試管培養條件下優化瞭基因工程菌E.coli BL21(DE3) pET15b/K5髮酵產可溶型非融閤血管生長抑製因子Kringle 5的培養基和誘導錶達條件.經菌體榦重測定和SDS-PAGE檢測,確定最佳培養基(g·L-1)為:胰蛋白胨10.0,酵母提取物5.0,NaCl 10.0,葡萄糖6.0,NH4Cl 2.6,NaH2PO45.0,Na2 HPO4 6.0；優化的誘導錶達條件為:誘導劑濃度0.01 mmol· L-1,誘導時間6h,誘導溫度37℃,搖床轉速220 r· min-1.在優化的培養基和誘導錶達條件下,菌體榦重為1.8g·L-1,Kringle 5錶達量為360 mg·L-1,佔總蛋白含量的20％,與基礎LB培養基相比,Kringle 5錶達量提高瞭1.18倍.
재실험실시관배양조건하우화료기인공정균E.coli BL21(DE3) pET15b/K5발효산가용형비융합혈관생장억제인자Kringle 5적배양기화유도표체조건.경균체간중측정화SDS-PAGE검측,학정최가배양기(g·L-1)위:이단백동10.0,효모제취물5.0,NaCl 10.0,포도당6.0,NH4Cl 2.6,NaH2PO45.0,Na2 HPO4 6.0；우화적유도표체조건위:유도제농도0.01 mmol· L-1,유도시간6h,유도온도37℃,요상전속220 r· min-1.재우화적배양기화유도표체조건하,균체간중위1.8g·L-1,Kringle 5표체량위360 mg·L-1,점총단백함량적20％,여기출LB배양기상비,Kringle 5표체량제고료1.18배.
