中华结核和呼吸杂志
中華結覈和呼吸雜誌
중화결핵화호흡잡지
Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases
2006年
8期
558-562
,共5页
刘春涛%王可%黎联%庞亚敏
劉春濤%王可%黎聯%龐亞敏
류춘도%왕가%려련%방아민
哮喘%白细胞介素5%嗜酸粒细胞趋化因子%大鼠
哮喘%白細胞介素5%嗜痠粒細胞趨化因子%大鼠
효천%백세포개소5%기산립세포추화인자%대서
目的 探讨支气管哮喘(简称哮喘)大鼠模型中白细胞介素5(IL-5)和嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)是否参与肺和骨髓间信号传导,观察不同干预措施的影响.方法 清洁级雄性Wistar大鼠40只,按随机数字表法分为正常对照组和哮喘组,每组20只.用卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型,于激发后30 min及6、12、24、48 h处死大鼠,分别取外周血涂片、骨髓细胞涂片.肺组织以10%甲醛固定做石蜡切片.将血涂片、骨髓涂片、肺组织切片行苏木精-伊红(HE)染色,观察细胞总数和嗜酸粒细胞(EOS)比例.取不同时间点肺组织匀浆,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织匀浆IL-5和eotaxin浓度.将不同时间点的肺组织匀浆与正常对照组和哮喘组大鼠骨髓细胞共同孵育,并分别加入地塞米松(DXM)、半乳凝素3(Galectin-3)、孟鲁司特钠、抗IL-5抗体进行干预,采用抗IL-5、抗IL-5Rα、抗eotaxin、抗CD34和抗CC趋化因子受体3(CCR3)多克隆抗体进行免疫组化染色,检测两组骨髓细胞中EOS计数和IL-5+细胞、IL-5Rα+细胞、CCR3+细胞、eotaxin+细胞、CD+34细胞的百分比.结果 哮喘大鼠外周血、骨髓、肺组织中EOS数分别为0.020 0±0.002 0、0.023±0.003、0.0250±0.0090,正常对照组分别为0.0100±0.0030、0.009±0.003、0.009 0±0.002 0,两组比较差异有统计学意义(t值分别为2.547、2.718、2.718,P均＜0.05);哮喘大鼠肺组织匀浆于激发6 h的IL-5为(89.3±2.4)pg/ml,12 h的eotaxin水平为(4.9±0.5)pg/ml,48 h均回到基线[(1.45±0.23)pg/ml]水平;除30 min外,各时间点哮喘大鼠肺组织匀浆均能诱导正常对照组或哮喘组大鼠骨髓细胞中CD+34、EOS、IL-5+、IL-5Rα+、CCR3+、eotaxin+细胞表达增加,Galectin-3干预哮喘大鼠骨髓细胞后,骨髓EOS、IL-5+、IL-5Rα+、CCR3+、eotaxin+和CD+34细胞表达减少(分别为0.021±0.005、0.074±0.007、0.138±0.014、0.067±0.010、0.040±0.005、0.087±0.012).结论 IL-5 mRNA转录选择性抑制物(Galectin-3)能抑制EOS炎症,有可能成为一种特异性的抗哮喘药物.
目的 探討支氣管哮喘(簡稱哮喘)大鼠模型中白細胞介素5(IL-5)和嗜痠粒細胞趨化因子(eotaxin)是否參與肺和骨髓間信號傳導,觀察不同榦預措施的影響.方法 清潔級雄性Wistar大鼠40隻,按隨機數字錶法分為正常對照組和哮喘組,每組20隻.用卵白蛋白(OVA)緻敏和激髮製作哮喘模型,于激髮後30 min及6、12、24、48 h處死大鼠,分彆取外週血塗片、骨髓細胞塗片.肺組織以10%甲醛固定做石蠟切片.將血塗片、骨髓塗片、肺組織切片行囌木精-伊紅(HE)染色,觀察細胞總數和嗜痠粒細胞(EOS)比例.取不同時間點肺組織勻漿,用酶聯免疫吸附測定(ELISA)法測定肺組織勻漿IL-5和eotaxin濃度.將不同時間點的肺組織勻漿與正常對照組和哮喘組大鼠骨髓細胞共同孵育,併分彆加入地塞米鬆(DXM)、半乳凝素3(Galectin-3)、孟魯司特鈉、抗IL-5抗體進行榦預,採用抗IL-5、抗IL-5Rα、抗eotaxin、抗CD34和抗CC趨化因子受體3(CCR3)多剋隆抗體進行免疫組化染色,檢測兩組骨髓細胞中EOS計數和IL-5+細胞、IL-5Rα+細胞、CCR3+細胞、eotaxin+細胞、CD+34細胞的百分比.結果 哮喘大鼠外週血、骨髓、肺組織中EOS數分彆為0.020 0±0.002 0、0.023±0.003、0.0250±0.0090,正常對照組分彆為0.0100±0.0030、0.009±0.003、0.009 0±0.002 0,兩組比較差異有統計學意義(t值分彆為2.547、2.718、2.718,P均＜0.05);哮喘大鼠肺組織勻漿于激髮6 h的IL-5為(89.3±2.4)pg/ml,12 h的eotaxin水平為(4.9±0.5)pg/ml,48 h均迴到基線[(1.45±0.23)pg/ml]水平;除30 min外,各時間點哮喘大鼠肺組織勻漿均能誘導正常對照組或哮喘組大鼠骨髓細胞中CD+34、EOS、IL-5+、IL-5Rα+、CCR3+、eotaxin+細胞錶達增加,Galectin-3榦預哮喘大鼠骨髓細胞後,骨髓EOS、IL-5+、IL-5Rα+、CCR3+、eotaxin+和CD+34細胞錶達減少(分彆為0.021±0.005、0.074±0.007、0.138±0.014、0.067±0.010、0.040±0.005、0.087±0.012).結論 IL-5 mRNA轉錄選擇性抑製物(Galectin-3)能抑製EOS炎癥,有可能成為一種特異性的抗哮喘藥物.
목적 탐토지기관효천(간칭효천)대서모형중백세포개소5(IL-5)화기산립세포추화인자(eotaxin)시부삼여폐화골수간신호전도,관찰불동간예조시적영향.방법 청길급웅성Wistar대서40지,안수궤수자표법분위정상대조조화효천조,매조20지.용란백단백(OVA)치민화격발제작효천모형,우격발후30 min급6、12、24、48 h처사대서,분별취외주혈도편、골수세포도편.폐조직이10%갑철고정주석사절편.장혈도편、골수도편、폐조직절편행소목정-이홍(HE)염색,관찰세포총수화기산립세포(EOS)비례.취불동시간점폐조직균장,용매련면역흡부측정(ELISA)법측정폐조직균장IL-5화eotaxin농도.장불동시간점적폐조직균장여정상대조조화효천조대서골수세포공동부육,병분별가입지새미송(DXM)、반유응소3(Galectin-3)、맹로사특납、항IL-5항체진행간예,채용항IL-5、항IL-5Rα、항eotaxin、항CD34화항CC추화인자수체3(CCR3)다극륭항체진행면역조화염색,검측량조골수세포중EOS계수화IL-5+세포、IL-5Rα+세포、CCR3+세포、eotaxin+세포、CD+34세포적백분비.결과 효천대서외주혈、골수、폐조직중EOS수분별위0.020 0±0.002 0、0.023±0.003、0.0250±0.0090,정상대조조분별위0.0100±0.0030、0.009±0.003、0.009 0±0.002 0,량조비교차이유통계학의의(t치분별위2.547、2.718、2.718,P균＜0.05);효천대서폐조직균장우격발6 h적IL-5위(89.3±2.4)pg/ml,12 h적eotaxin수평위(4.9±0.5)pg/ml,48 h균회도기선[(1.45±0.23)pg/ml]수평;제30 min외,각시간점효천대서폐조직균장균능유도정상대조조혹효천조대서골수세포중CD+34、EOS、IL-5+、IL-5Rα+、CCR3+、eotaxin+세포표체증가,Galectin-3간예효천대서골수세포후,골수EOS、IL-5+、IL-5Rα+、CCR3+、eotaxin+화CD+34세포표체감소(분별위0.021±0.005、0.074±0.007、0.138±0.014、0.067±0.010、0.040±0.005、0.087±0.012).결론 IL-5 mRNA전록선택성억제물(Galectin-3)능억제EOS염증,유가능성위일충특이성적항효천약물.
