CAJ | 학술논문

中国人手足裂畸形患者中染色体10q24.3区域DNA重复突变的鉴定
중국인수족렬기형환자중염색체10q24.3구역DNA중복돌변적감정
A DNA duplication at chromosome 10q24.3 is associated with split-hand/split-foot malformation in a Chinese family

万方数据

中华医学杂志中華醫學雜誌 중화의학잡지
National Medical Journal of China
2006年 10期 652-658 ,共7页

杨威%胡周军%余晓芬%李气环%张爱菊%邓曦%张爱英%高春生%刘扬%敖杨%罗会元%张学

양위%호주군%여효분%리기배%장애국%산희%장애영%고춘생%류양%오양%라회원%장학

肢畸形,先天性%基因,重复%TP63基因%手足裂畸形肢畸形,先天性%基因,重複%TP63基因%手足裂畸形
지기형,선천성%기인,중복%TP63기인%수족렬기형

目的鉴定一个中国人手足裂畸形(SHFM)家系的致病突变,揭示该家系中手足裂畸形发生的分子遗传基础.方法回顾家系(4代共5例患者)中3例患者已有X线检查资料,补拍畸形手足外观照片.采集其中2例患者外周血进行高分辨G显带核型分析.从现有4名家系成员(包括3例患者)外周血样品中提取基因组DNA.针对TP63基因全部16个外显子(包括外显子/内含子交界区)设计并合成引物,以1例患者基因组DNA为模板进行聚合酶链反应(PCR)扩增和产物直接测序.在已知的5个SHFM位点染色体区域选择微卫星标记,通过PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析家系成员的基因型.对染色体10q24.3区域SHFM3位点内微卫星标记的多态片段进行测序分析,比较患者和基因型相同的正常对照个体不同等位片段测序峰高度的差别.结果家系中现存3例患者双手均为桡侧指/掌骨缺失,2例患者双足表现中央轴趾/跖骨缺失,1例患者双足仅剩腓侧趾/跖骨,都符合典型手足裂畸形的临床表现.对患者进行高分辨G显带核型分析,未见染色体数目异常或结构畸变;对患者DNA进行TP63基因测序,未发现突变.通过检测微卫星标记进行基因型分析,发现患者在SHFM1、SHFM4和SHFM5三个位点不表现单体型共享,而在SHFM2和SHFM3两个位点则共享某一单体型,提示本家系中手足裂畸形表型可能由SHFM2或SHFM3位点的突变引起.进一步分析SHFM2和SHFM3两个位点微卫星标记的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果,发现患者在SHFM3位点的患者共享等位片段呈现信号增强现象.以相同基因型正常人为对照个体进行微卫星标记的比较测序分析,发现患者间共享等位片段的测序峰在患者中增高约1倍.以上结果表明,本家系患者发生了SHFM3位点内的DNA重复.结论首次在中国人手足裂畸形患者中发现染色体10q24.3区域DNA重复突变.
목적감정일개중국인수족렬기형(SHFM)가계적치병돌변,게시해가계중수족렬기형발생적분자유전기출.방법회고가계(4대공5례환자)중3례환자이유X선검사자료,보박기형수족외관조편.채집기중2례환자외주혈진행고분변G현대핵형분석.종현유4명가계성원(포괄3례환자)외주혈양품중제취기인조DNA.침대TP63기인전부16개외현자(포괄외현자/내함자교계구)설계병합성인물,이1례환자기인조DNA위모판진행취합매련반응(PCR)확증화산물직접측서.재이지적5개SHFM위점염색체구역선택미위성표기,통과PCR확증화취병희선알응효전영분석가계성원적기인형.대염색체10q24.3구역SHFM3위점내미위성표기적다태편단진행측서분석,비교환자화기인형상동적정상대조개체불동등위편단측서봉고도적차별.결과가계중현존3례환자쌍수균위뇨측지/장골결실,2례환자쌍족표현중앙축지/척골결실,1례환자쌍족부잉비측지/척골,도부합전형수족렬기형적림상표현.대환자진행고분변G현대핵형분석,미견염색체수목이상혹결구기변;대환자DNA진행TP63기인측서,미발현돌변.통과검측미위성표기진행기인형분석,발현환자재SHFM1、SHFM4화SHFM5삼개위점불표현단체형공향,이재SHFM2화SHFM3량개위점칙공향모일단체형,제시본가계중수족렬기형표형가능유SHFM2혹SHFM3위점적돌변인기.진일보분석SHFM2화SHFM3량개위점미위성표기적취병희선알응효전영결과,발현환자재SHFM3위점적환자공향등위편단정현신호증강현상.이상동기인형정상인위대조개체진행미위성표기적비교측서분석,발현환자간공향등위편단적측서봉재환자중증고약1배.이상결과표명,본가계환자발생료SHFM3위점내적DNA중복.결론수차재중국인수족렬기형환자중발현염색체10q24.3구역DNA중복돌변.