温州医学院学报
溫州醫學院學報
온주의학원학보
JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL COLLEGE
2012年
2期
143-145,150
,共4页
成纤维细胞%体外培养%内毒素%急性炎症%大鼠%动物模型
成纖維細胞%體外培養%內毒素%急性炎癥%大鼠%動物模型
성섬유세포%체외배양%내독소%급성염증%대서%동물모형
目的:探讨大鼠肺成纤维细胞体外培养及急性炎症模型建立的方法.方法:采用胰酶消化法、差速贴壁法,分离、纯化肺成纤维细胞,然后采用H-DMEM培养液进行细胞培养.采用免疫荧光法对所分离的细胞进行鉴定.采用脂多糖(LPS)干预建立成纤维细胞体外急性炎症模型,实验分组:空白组、0.1 μg/mL LPS组、1μg/mL LPS组、10 μg/mL LPS组,并利用细胞增殖/毒性检测试剂(MTT)在干预后3、6、9 h分别测定吸光度(OD)值.结果:成纤维细胞体外培养24 h后,镜下可见组织块周边有长梭型细胞爬出,72 h后生长迅速,4d接近融合.经免疫荧光测定,肺成纤维细胞波形蛋白(vimentin)阳性,CD31阴性.在干预后各时间段中,1 μg/mL LPS组测得的OD值高于其他各组,在1μg/mL LPS组中,干预后6h测得的OD值高于其他各时间段,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:该法可以体外培养出大鼠肺成纤维细胞,用浓度为1 μg/mL的LPS干预体外培养的成纤维细胞6h能建立较为合理的急性炎症模型.
目的:探討大鼠肺成纖維細胞體外培養及急性炎癥模型建立的方法.方法:採用胰酶消化法、差速貼壁法,分離、純化肺成纖維細胞,然後採用H-DMEM培養液進行細胞培養.採用免疫熒光法對所分離的細胞進行鑒定.採用脂多糖(LPS)榦預建立成纖維細胞體外急性炎癥模型,實驗分組:空白組、0.1 μg/mL LPS組、1μg/mL LPS組、10 μg/mL LPS組,併利用細胞增殖/毒性檢測試劑(MTT)在榦預後3、6、9 h分彆測定吸光度(OD)值.結果:成纖維細胞體外培養24 h後,鏡下可見組織塊週邊有長梭型細胞爬齣,72 h後生長迅速,4d接近融閤.經免疫熒光測定,肺成纖維細胞波形蛋白(vimentin)暘性,CD31陰性.在榦預後各時間段中,1 μg/mL LPS組測得的OD值高于其他各組,在1μg/mL LPS組中,榦預後6h測得的OD值高于其他各時間段,差異均有統計學意義(P＜0.05).結論:該法可以體外培養齣大鼠肺成纖維細胞,用濃度為1 μg/mL的LPS榦預體外培養的成纖維細胞6h能建立較為閤理的急性炎癥模型.
목적:탐토대서폐성섬유세포체외배양급급성염증모형건립적방법.방법:채용이매소화법、차속첩벽법,분리、순화폐성섬유세포,연후채용H-DMEM배양액진행세포배양.채용면역형광법대소분리적세포진행감정.채용지다당(LPS)간예건립성섬유세포체외급성염증모형,실험분조:공백조、0.1 μg/mL LPS조、1μg/mL LPS조、10 μg/mL LPS조,병이용세포증식/독성검측시제(MTT)재간예후3、6、9 h분별측정흡광도(OD)치.결과:성섬유세포체외배양24 h후,경하가견조직괴주변유장사형세포파출,72 h후생장신속,4d접근융합.경면역형광측정,폐성섬유세포파형단백(vimentin)양성,CD31음성.재간예후각시간단중,1 μg/mL LPS조측득적OD치고우기타각조,재1μg/mL LPS조중,간예후6h측득적OD치고우기타각시간단,차이균유통계학의의(P＜0.05).결론:해법가이체외배양출대서폐성섬유세포,용농도위1 μg/mL적LPS간예체외배양적성섬유세포6h능건립교위합리적급성염증모형.
