中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2011年
8期
35-39
,共5页
卫兵艳%刘田福%郭永昌%张引红
衛兵豔%劉田福%郭永昌%張引紅
위병염%류전복%곽영창%장인홍
RNA提取%周脂素%RT-PCR%基因克隆%序列分析
RNA提取%週脂素%RT-PCR%基因剋隆%序列分析
RNA제취%주지소%RT-PCR%기인극륭%서렬분석
目的 用改进后的方法提取高质量的RNA,以此为模板,应用T-A克隆法克隆C57BL/6J小鼠周脂素基因编码区,对其进行测序验证,并与GenBank比对.方法 在试剂说明书基础上,改进提取脂肪组织RNA的方法,从C57BL/6J附睾脂肪组织提取高质量的总RNA,用RT-PCR扩增出周脂素编码区基因,并将目的基因编码区克隆入pMD18-T载体中,转化E-coli JM109后,筛选阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定后,对其进行测序验证,并与GenBank比对.结果 用改进后的方法成功提取出了高质量的总RNA,并且成功提取构建的重组载体中含有周脂素基因的全长序列,与GenBank公布的序列一致.结论 改进的后的脂肪组织RNA提取方法是可行的,并获得周脂素基因的cDNA.为进一步研究其生物学功能奠定了基础.
目的 用改進後的方法提取高質量的RNA,以此為模闆,應用T-A剋隆法剋隆C57BL/6J小鼠週脂素基因編碼區,對其進行測序驗證,併與GenBank比對.方法 在試劑說明書基礎上,改進提取脂肪組織RNA的方法,從C57BL/6J附睪脂肪組織提取高質量的總RNA,用RT-PCR擴增齣週脂素編碼區基因,併將目的基因編碼區剋隆入pMD18-T載體中,轉化E-coli JM109後,篩選暘性剋隆,通過限製性內切酶酶切鑒定後,對其進行測序驗證,併與GenBank比對.結果 用改進後的方法成功提取齣瞭高質量的總RNA,併且成功提取構建的重組載體中含有週脂素基因的全長序列,與GenBank公佈的序列一緻.結論 改進的後的脂肪組織RNA提取方法是可行的,併穫得週脂素基因的cDNA.為進一步研究其生物學功能奠定瞭基礎.
목적 용개진후적방법제취고질량적RNA,이차위모판,응용T-A극륭법극륭C57BL/6J소서주지소기인편마구,대기진행측서험증,병여GenBank비대.방법 재시제설명서기출상,개진제취지방조직RNA적방법,종C57BL/6J부고지방조직제취고질량적총RNA,용RT-PCR확증출주지소편마구기인,병장목적기인편마구극륭입pMD18-T재체중,전화E-coli JM109후,사선양성극륭,통과한제성내절매매절감정후,대기진행측서험증,병여GenBank비대.결과 용개진후적방법성공제취출료고질량적총RNA,병차성공제취구건적중조재체중함유주지소기인적전장서렬,여GenBank공포적서렬일치.결론 개진적후적지방조직RNA제취방법시가행적,병획득주지소기인적cDNA.위진일보연구기생물학공능전정료기출.
